Recuperação das enzimas Alfa e Beta - amilases em sistema bifasico aquoso PEG / CACL2 para uso como biocatalisador de amilaceos

Neste trabalho estudou-se o comportamento do sistema bifásico aquoso (SBA) PEGI CaCl2, a pH's 5,0; 6,0 e 7,0; e massas molares do polímero de 4000, 6000 e 8000, a condições ambientais de temperatura e pressão, bem como se determinou o coeficiente de partição com o sistema operando em batelada e contínuo, com a finalidade de recuperar as enzimas ? e ?-amilases de malte de milho (Zea mays), e desta forma agregar valor a esta cultura. As enzimas foram obtidas pela germinação de sementes de milho selecionadas. Determinaram-se as atividades enzimáticas pelo método de Wohlgnuth modificado por Sandstedt, Kneen, Blich (1959) e pelo método do Laboratório Milles (1958) apresentados por REGULY (1996), bem como a concentração de proteína total pelo método de BRADFORD (1976). Comparou-se o comportamento cinético das enzimas em PEG e em malte, nas temperaturas e pHs ótimos. A recuperação foi feita em processo de extração em batelada e contínuo, com otimizações feitas a partir de planejamentos fatoriais dos experimentos. Ao se caracterizar o SBA PEG/ CaCl2 observou-se que seu comportamento foi semelhante aos descritos pela literatura. O modelo empírico que mais se ajustou aos dados da partição em batelada foi linear ao lnK. A combinação do coeficiente de partição otimizado e dos melhores dados de atividade enzimática indicou o SBA PEG 4000/ CaCl2, a pH 5,0; como sendo o melhor sistema a ser utilizado na extração contínua destas enzimas. O estudo cinético comparativo mostrou que as enzimas em PEG possuem um maior potencial catalítico que às em malte, com máxima atividade enzimática a 75°C. A otimização da extração contínua apresentou como equação de processo, que mais se ajustou aos dados experimentais, o modelo quadrático da rotação das palhetas e da razão entre as vazões com o coeficiente de partição, sendo que sua região ótima se direciona para os menores valores destas variáveis independentes. Desta forma contribuiu se na descoberta das condições ótimas de utilização do meio extrativo (SBA PEG/ CaCl2) e de operação da coluna de extração, para a recuperação das enzimas ? e ?-amilases de malte de sementes de milho (Zea mays)Aqueous two-phase systems (A TPS) PEG/ CaCl2 was studying in pH 5,0; 6,0 and 7,0 and polymer molecular weight 4000, 6000 and 8000, in environment pressure and temperature. The enzymes ? and ?-amylases from maize malt was recovered in bath and continuous extraction process, it was valorized this product. The enzymes were obtained by germination of maize seeds. It was determinate of the enzymatic activity by modify Wohlghnuth method, Sandstedt, Kneen, Blich (1959) and Milles Laboratory method (1958), showed in REGUL Y (1996), and protein total by BRADFORD method (1976). The kinetic study was making between the enzymatic extract in PEG and maize malt, in optimum condition of enzymes. The enzymes were recovered in bath and continuous process systems. It was making an experimental plain for process optimization. A TPS PEG/ CaCl2 had similar conduct to literature description. The adjusted empiric model to bath partition was linear with lnK. The combination of partition coefficient with enzymatic activity optimums showed the best system for recovery of the enzymes as been the A TPS PEG 4000/ CaCl2, at pH 5,0. The kinetic study introduced a high catalytic power in enzymatic extract in PEG. The optimization of the continuous extraction process carried to a quadratic model of the pallet rotation and flow rate with the partition coefficient, where optimum region showed it in the value minor of the independents variable