Estudo de fatores de virulencia em amostras de Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli B - lactamases espectro estendidas

A patogênese da K.pneumoniae e Ecoli pode ser diretamente influenciada pelos fatores de virulência, dentre os quais encontram-se polissacarídeos capsulares, lipopolissacarídeos tóxicos, adesinas e sistema de aquisição de ferro. Além desses fatores de virulência, muito pouco é conhecido sobre outros fatores que podem participar da patogênese da K.pneumoniae. O presente trabalho estuda os fatores de virulência de K.pneumoniae e Ecoli isoladas de infecções nosocomiais em amostras ESBL (+) e ESBL (-), tendo como objetivos a comparação do grau de patogenicidade e produção de fatores de virulência por essas amostras in vivo e in vitro; a verificação da influência das condições de cultivo sobre a expressão de citotoxinas; o estudo do padrão de adesão em linhagens celulares; análise da influência da dose subinibitória de antibióticos beta-Iactâmicos sobre a produção de fatores de virulência pelas amostras ESBL (+). K.pneumoniae e Ecoli ESBL (+) apresentaram atividades hemolíticas moduladas pelo meio de cultura e pelas condições de cultivo, frente a sangue de eqüino e carneiro. A dose subinibitória do antibiótico estimulou a produção da hemolisina, sobre hemácias de eqüinos em meio Müller-Hinton apenas na presença do oxigênio. A carência de ferro nos meios induziu a produção de hemolisina, independente da aeração para hemácias eqüinas pelas amostras ESBL (+). O sobrenadante das culturas bacterianas apresentou atividade citotóxica em culturas de células HeLa, Vero e HT-29. Amostras ESBL (+) foram mais resistentes à ação bactericida do soro humano normal Que as ESBL (-). O padrão de adesão predominante entre amostras foi do tipo agregativo. Não foi observada diferença no grau de virulência para camundongos entre amostras ESBL (+) e ESBL(-)Virulence factors, such endotoxin, adhesins, cell envelope and the acquisition of iron system may be associated with K. pneumoniae and E. coli pathogenicity. However others virulence factors are not yet studied for understanding pathogeneses of K. pneumoniae. The aim of the present study is the comparation of potential virulence factors in strains of K. pneumoniae and E.coli ESBL (+) and ESBL (-) isolated from nosocomial infections, such characterization of adhesive properties in eukaryotic cells , influence of sub inhibitory dose of beta-Iactams antibiotics in toxins expression and virulence factors production in ESBL (+) strains. K. pneumonia e and E. coli ESBL (+) showed hemolytic activity towards sheep and horse erythrocytes regulated by culture conditions. The sub inhibitory dose of beta lactams antibiotics increased the hemolysin production in Mueller-Hinton agar with horse erythrocytes in oxygen presence. The iron absence in media culture improved the hemolytic activity expression, with horse erythrocytes in ESBL (+) strains independent of oxygen. The bacterial supematant culture showed cytotoxic activity in HeLa, Vero and HT -29 cell lines. The ESBL (+) strains were more resistant to the bactericidal action of normal human serum than the ESBL (-). The aggregative pattern of adherence was the predominant among E. colí and K. pneumoniae and was not observed virulence differences in mice in ESBL (+) and ESBL (-) strain