Estudo in vitro da compatibilidade do osso bovino misto quimicamente tratado

Dentre os biomateriais que visam auxiliar a regeneração óssea, destacam-se os de origem bovina. Têm sido avaliados diferentes protocolos de tratamento químico do osso bovino com a finalidade de preservar os componentes orgânicos (colágeno) e inorgânicos (hidroxiapatita), resultando no Osso Bovino Misto (OBM), a fim de aumentar a resistência mecânica do material. Apesar do OBM apresentar-se como um material promissor para uso na clínica médico-odontológica, por conciliar resistência e resiliência, deve-se certificar a ausência de efeitos tóxicos ou ativação do sistema imune do organismo, ou seja, sua biocompatibilidade. O objetivo deste trabalho foi avaliar a citocompatibilidade do OBM por meio de testes de citotoxicidade (Norma ISO 10993), análise morfológica e estudo da interação célula-material. Os ensaios de citotoxicidade consistiram de contagem de células, redução do MTT e captação do Vermelho Neutro. Nesses testes, células da linhagem Balb/c 3T3 foram incubadas com diferentes concentrações do extrato puro do OBM (100mg/mL), a 37oC, 24 h. Nesses ensaios, verificamos diferença estatisticamente significante entre o grupo controle (não tratado) e as concentrações superiores a 50 mg/mL (p<0,01, Análise de Variância, teste de Tukey), similar à proporcionada pelo GENOX ® orgânico e GEN-OX® inorgânico, comercialmente disponíveis. Estes resultados foram confirmados pela análise da morfologia das células tratadas nas diferentes condições, utilizando microscopia óptica de luz. A análise da interação célula-material (por microscopia eletrônica de varredura) somente foi possível após diálise do material (água deionizada) e condicionamento (72 h) em Meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) + 10% Soro Fetal Bovino (SFB). Concluímos que concentrações do extrato do OBM acima de 50 mg/mL diminuem significativamente o número de células, as funções mitocondrial e lisossomal. Provavelmente isto se deve à presença de resíduos do processamento do material, indicando a necessidade de otimização do processoBiomaterials have been developed and investigated aiming to help bone regeneration. Xenografts of bovine origin stand out due to their biocompatibility, low cost and availability. Some protocols have been tested to develop a chemically treated material containing the anorganic (hydroxiapatite) and the organic (collagen) components of bovine boned: the mixed bovine bone (MBB). In spite of the MBB has been shown as a promising material for dental and medical applications, due to its resistance and resilience, it must be certified that this material is atoxic and do not activate the immunological system of the organism. The purpose of this investigation was to evaluate the MBB cytocompatibility by the use of cytotoxicity tests (ISO 10993), morphological analysis and cell-material interaction studies. The cytotoxicity assays consisted of cell number determination, MTT reduction and Neutral Red uptake. In these tests, Balb/c 3T3 cell lines were treated with different concentrations of MBB extract (100mg/mL, 37oC, 24h). Statistically significant differences were observed among control group (no treatment) and concentrations higher than 50 mg/mL (p< 0.01, ANOVA, Tukey?s test), similar to results observed for organic and inorganic bovine bone (Gen-Ox®). Morphological analysis (optical microscopy) confirmed these results. Cell-material interaction (scanning electron microscopy) was studied only after material dialysis and 72 h conditioning (Dulbecco Modified Eagle Medium, DMEM, plus 10% Fetal Calf Serum, FCS). Fibroblast proliferation and cell adhesion to the material were observed. We conclude that concentrations of MBB extract higher than 50mg/mL decreased significantly the cell number, mitochondrial and lisosomal function. Probably toxic residues from manufacturing procedures remain in the material, indicating that process optimization should be considere