Effect of Uroguanylin on hydrogen transport in rat renal tubules and in proximal and distal cells lines

Uroguanilina (UGN) é um peptídeo normalmente sintetizado no intestino que modula o balanço de sódio através de ações renais. Investigamos os efeitos e os mecanismos de sinalização envolvidos na ação da UGN sobre a secreção de H+, em túbulos renais de ratos e em células LLC-PK1 (proximais) e MDCK-C11 (distais). Nos estudos in vivo foi utilizada a técnica de microperfusão estacionária, na qual medimos a secreção de H+ em túbulos proximais e distais de rins de rato, utilizando um microeletrodo sensível a H+. Nos estudos in vitro, para medir a atividade de NHE3 e H+-ATPase, utilizamos microscopia de fluorescência, usando BCECF como sonda sensível a pH. Nossos dados indicam que UGN inibe a secreção de hidrogênio em túbulos proximais e em células LLC-PK1 por um mecanismo dependente da inibição do permutador NHE3, envolvendo a ativação de PKG e PKA. Nosso estudo também sugere que UGN inibe a secreção de hidrogênio em túbulos distais de rato e em células MDCK-C11, envolvendo a inibição da atividade da H+-ATPase por um mecanismo dependente de PKGUroguanylin (UGN) is a peptide usually synthesized in the intestine that modulates sodium balance through actions on the kidney. We investigate the effects and signaling mechanisms involved in the UGN action on hydrogen secretion in rat renal tubules and in LLC-PK1 and MDCK-C11 cells. In the in vivo studies we used the stationary microperfusion method, measuring hydrogen secretion in proximal and distal tubules by a H+ sensitive microelectrode. In the in vitro studies, we used fluorescence microscopy to measure the activity of NHE3 and H+-ATPase, using BCECF as pH sensitive dye. Our data indicate that UGN inhibits the hydrogen secretion in proximal tubules and in LLC-PK1 cells by a mechanism dependent on the inhibition of NHE3, involving the activation of PKG and PKA. Our study also suggests that UGN inhibits hydrogen secretion in distal tubules and MDCK-C11 cells., and the inhibition of H+-ATPase by a mechanism dependent on PKG is involved in this distal effect of UGN