Envolvimento do receptor de potencial transitório A1 (TRPA1) na manutenção da hiperalgesia mecânica e térmica (Frio) na inflamação persistente

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pos-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2010O presente estudo investiga o papel do receptor TRPA1 no esenvolvimento e manutenção da hiperalgesia mecânica e inflamatóriana inflamação persistente induzida pelo Adjuvante Completo de Freund (CFA) em camundongos. A injeção intraplantar (i.pl.) de CFA induz uma hiperalgesia de longa duração (28 dias) para o estímulo mecânico e térmico. A injeção intraperitoneal (i.p., 30-300 mg/kg), intraplantar (i.pl., 100 µg/sítio) ou intratecal (i.t., 10 µg/sítio) do antagonista seletivo dos receptores TRPA1, o HC-030031, reduz significativamente a hiperalgesia mecânica avaliada pelo teste de filamentos de von Frey. Entretanto, a injeção intracerebroventricular (i.c.v., 10 µg/sítio) do HC- 030031 não interfere na hiperalgesia induzida por CFA. O tratamento com HC-030031 (300 mg/kg, i.p.) inibe completamente a hiperalgesia ao frio nocivo induzido pelo tetrafluoroetano em camundongos que receberam CFA. O pré-tratamento com o RNA de interferência contra o receptor TRPA1 (AS-ODN, i.t.) previne significativamente a hiperalgesia mecânica e térmica. Interessantemente, tanto a expressão da proteína quanto o RNA mensageiro apresentam de forma aumentada na medula espinhal e no gânglio da raiz dorsal (GRD) em camundongos tratados com CFA, efeito esse que foi reduzido pelo pré-tratamento com o antagonista seletivo do TRPA1, o HC-030031. Esses dados em conjunto, mostram que o receptor TRPA1 presente na periferia ou no SNC em níveis espinhais desempenham um importante papel no desenvolvimento e manutenção da hiperalgesia mecânica e térmica (frio) durante o quadro inflamatório induzido pelo CFA. Deste modo, o bloqueio seletivo dos receptores TRPA1 representa uma estratégia farmacológica promissora no tratamento da hiperalgesia em estados de inflamação persistente.This study investigated the role of TRPA1 in the development and maintenance of mechanical and cold hyperalgesia in persistent inflammation induced by Complete Freund#s Adjuvant (CFA) in mice. The intraplantar (i.pl.) injection of CFA induced a long lasting (28 days) hyperalgesia for both mechanical and thermal (cold) stimuli. The intraperitoneal (i.p., 30#300 mg/kg), intraplantar (i.pl., 100 lg/site) or intrathecal (i.t., 10 lg/site) injection of the TRPA1 selective antagonist HC- 30031 significantly reduced the mechanical hyperalgesia evaluated by the von Frey hair test. The effect of HC-030031 was evidenced on the day after CFA injection and was kept throughout the test. However, the intracerebroventricular (i.c.v., 10 lg/site) injection of HC-030031 did not interfere with CFA-induced hyperalgesia. Treatment with HC- 030031 (300 mg/kg, i.p.) completely inhibited the noxious cold hyperalgesia induced by tetra fluoroethane in mice that received CFA. The pre-treatment with the TRPA1 oligonucleotide antisense (AS-ODN, i.t.) consistently prevented both mechanical and cold hyperalgesia. Interestingly, both TRPA1 protein expression and mRNA were overexpressed in spinal cord and dorsal root ganglia (DRG) of mice treated with CFA, an effect that was fully prevented by the pre-treatment with the TRPA1 antagonist HC-030031. Collectively, the present results showed that TRPA1 present at either peripheral or spinal sites play a relevant role in the development and maintenance of both mechanical and cold hyperalgesia during CFA-induced inflammation. Thus, TRPA1 selective antagonists represent promising candidates to treat hyperalgesia in persistent inflammatory states