Efeito reativador de oximas frente à inibição da enzima acetilcolinesterase cerebral induzida pelo malation e malaoxon

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Bioquímica, Florianópolis, 2009.O malation e um pesticida organofosforado (OF) e sua toxicidade depende da sua bioativacao a malaoxon. O envenenamento por malation tem sido tratado com um antagonista do receptor colinergico (atropina) e com oximas (principalmente pralidoxima) em uma tentativa de reativar a acetilcolinesterase (AChE) inibida pelo OF. Contudo, o tratamento com pralidoxima nao tem sido eficiente para reativar a AChE inibida pelo malaoxon e o seu uso rotineiro tem sido questionado. Um dos objetivos deste estudo foi avaliar a potencia in vitro de oximas padrao e de oximas recentemente sintetizadas em reativar a AChE derivada do sobrenadante de cerebro de camundongos, apos inibicao por malaoxon. O malaoxon exibiu um efeito inibitorio dependente da concentracao contra a AChE cerebral de camundongo (IC50 = 3.18 ÊM). A pralidoxima demonstrou um significativo, porem modesto efeito de reativacao da AChE inibida pelo malaoxon (30% de reativacao na concentracao de 600 ÊM). Embora as oximas HI-6 e metoxima exibiram efeitos de reativacao similares quando comparadas com a pralidoxima, as oximas obidoxima e trimedoxima mostraram maior eficacia de reativacao (em torno de 70% de reativacao na concentracao de 600 ÊM). As oximas recentemente desenvolvidas K074 e K075 demonstraram maior efeito de reativacao (em torno de 55% de reativacao na concentracao de 600 ÊM) quando comparadas com a pralidoxima. Os resultados deste estudo mostram que as oximas padrao obidoxima e trimedoxima e as oximas ineditas K074 e K075 apresentam efeitos de reativacao superior da enzima AChE de cerebro de camundongos inibida pelo malaoxon sob condicoes in vitro quando comparadas com a pralidoxima. O segundo objetivo do trabalho foi avaliar o potencial efeito benefico das oximas K074, K075 e trimedoxima na reversao de efeitos deleterios induzidos pela exposicao ao malation na atividade da enzima AChE e em alguns parametros de estresse oxidativo em cortex pre-frontal e hipocampo de camundongos adultos. A administracao de malation (na dose de 1,25 g/kg, s.c.) inibiu significativamente (em torno de 50 %) a atividade da enzima AChE no cortex pre-frontal dos animais 24 h apos a administracao. A oxima padrao pralidoxima (. da DL50 e em combinacao com a atropina) diminuiu significativamente este efeito. A oxima inedita K074 (. da DL50 e em combinacao com a atropina) apresentou baixo efeito de reativacao da AChE, enquanto as outras oximas estudadas (trimedoxima e K075; . da DL50 e em combinacao com a atropina) nao tiveram efeitos reativadores. A atividade da AChE ix hipocampal nao foi inibida apos exposicao aguda ao malation. A exposicao ao malation causou uma diminuicao significativa na atividade glutationa peroxidase e glutationa redutase no cortex pre-frontal doa animais, mas os niveis de glutationa nao foram afetados nesta mesma estrutura. Estes resultados demonstraram que a oxima padrao pralidoxima foi o melhor reativador da AChE inibida pelo malation, enquanto que as oximas ineditas K074 e K075 e a oxima padrao trimedoxima apresentaram somente modesto ou nenhum efeito de reativacao. Esta aparente contradicao entre dados in vitro e in vivo esta provavelmente relacionada com as baixas doses das oximas K074, K075 e trimedoxima usadas no experimento in vivo