Avaliação do efeito antinociceptivo causado pela estimulação do acuponto BL60 (KUNLUN) em camundongos

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências.A acupuntura é uma técnica milenar que tem sido usada para o tratamento de diversos tipos de dores. O presente estudo analisou a ação antinociceptiva da estimulação do acuponto BL60 (Kunlun) em modelos de nocicepção induzida pelo ácido acético, glutamato e formalina em camundongos. Primeiramente foi avaliada a possível atividade antinociceptiva causada pela acupuntura no acuponto BL60 (Kunlun), bem como se o tempo em que a agulha permanece retida no acuponto tem influência nestes resultados no teste das contorções abdominais induzidas pelo ácido acético. Observou-se que a acupuntura no acuponto BL60 (Kunlun) reduziu o número de contorções abdominais de maneira dependente do tempo, sendo que as inibições observadas foram 38±7%, 38±8%, 27±8% e 54±15% para os tempos de 5, 10, 20 e 30 minutos de estímulo, respectivamente. Além disso, foi observado que esta antinocicepção dura até duas horas após o estímulo com inibições de 49±5%, 70±7%, 63±7% e 42±5% do número de contorções abdominais para os tempos de zero, 30 minutos, 1 e 2 horas após o estímulo, respectivamente. A estimulação de um falso ponto (Sham) não causou redução significativa do número de contorções abdominais induzidas pelo ácido acético. No modelo de nocicepção induzida pela injeção intraplantar de glutamato, a acupuntura no acuponto BL60 (Kunlun) também se mostrou efetiva em reduzir o comportamento nociceptivo com inibição 38±7%. Da mesma forma, causou inibição significativa da nocicepção de origem neurogênica (29+10 %) e inflamatória (44+9%) induzida pela injeção intraplantar de formalina. A antinocicepção causada pela estimulação do acuponto BL60 (Kunlun) foi revertida de forma significativa pelo prétratamento dos animais com naloxona (antagonista não seletivo de receptores opióides, 1 mg/kg, i.p.), naloxona metiodida (antagonista não seletivo de receptores opióides que não atravessa a barreira hemato-encefálica, 1 mg/kg, s.c.), PCPA (inibidor da síntese de serotonina, 100 mg/kg, i.p., por 4 dias) e WAY100635 (antagonista dos receptores 5-HT1A, 0,1 mg/kg, i.p.), mas não foi alterada pelo tratamento dos animais com cetanserina (antagonista dos receptores 5-HT2A, 0,3 mg/kg, i.p.), ondansetrona (antagonista dos receptores 5-HT3, 0,5 mg/kg, i.p.), prasozina (antagonista R1 adrenérgico 0,15 mg/kg i.p.), ioimbina (antagonista dos receptores R-2 adrenérgicos, 0,15 mg/kg, i.p.) ou sulpirida (antagonista dopaminérgico tipo D2, 1,0 mg/kg, i.p.). Os dados do presente estudo demonstram claramente que a acupuntura no acuponto BL60 (Kunlun) produz antinocicepção em vários modelos de nocicepção química em camundongos. O mecanismo de ação envolve, pelo menos em parte, a estimulação do sistema opióide central e periférico e serotoninérgico (via receptores 5-HT1A), mas não adrenérgico nem dopaminérgico. Acupuncture is a millenary technique which has been used in the treatment of many kinds of pain. The present study analysed the antinociceptive action of the stimulation at BL60 acupoint (Kunlun) in models of nociception caused by acetic acid, glutamate and formalin in mice. Initially it was evaluated the possible antinociceptive activity of acupuncture at BL60 (Kunlun) and if the period of permanence of the needle at the acupoint has influence in these results, in the test of abdominal writhes induced by acetic acid. It was observed that acupuncture at BL60 (Kunlun) reduced the abdominal writhes in a time-dependent condition with inhibitions of 38±7%, 38±8%, 27±8% and 54±15%, respectively for the periods of 5, 10, 20 and 30 minutes of stimulation. It was also observed that this antinociception lasts until two hours after stimulation, with inhibitions of 49±5%, 70±7%, 63±7% and 42±5% in the abdominal writhes number for the periods of zero, 30 minutes, 1 and 2 hours of stimulation, respectively. The stimulation at a false-point (Sham) does not cause significant decrease in the abdominal writhes number induced by acetic acid. In the model of nociception by intraplantar injection of glutamate, acupuncture at BL60 (Kunlun) was also effective in decrease the nociceptive behavior, with inhibition of 38±7%. In the same way, significant inhibition at the nociception of neurogenic (29 + 10 %) and inflammatory (44 + 9%) origin induced by formalin was observed. The antinociceptive effect caused by acupuncture at BL60 (Kunlun) was significantly reversed by the pretreatment of animals with naloxone (non selective opioid receptor antagonist, 1 mg/Kg, i.p.), naloxone methiodide (non selective opioid receptor antagonist that does not cross the hemato-encephalic barrier, 1 mg/Kg, s.c.), PCPA (inhibitor of serotonin synthesis, 100 mg/Kg i.p., 4 consecutive days) and WAY100635 (selective 5HT1A receptor antagonist, 0.1mg/Kg i.p.), but it was not reversed by the pre-treatment with ketanserin (5-HT2A receptor antagonist, 0.3 mg/kg, i.p.), ondansetron (5-HT3 receptor antagonist, 0.5 mg/kg, i.p.), prasozin (R1 adrenergic antagonist, 0.15 mg/kg i.p.), yoimbine (R-2 adrenergic antagonist, 0.15 mg/kg, i.p.) or sulpiride (D2 dopaminergic receptor antagonist, 1.0 mg/kg, i.p.). The present study clearly show that acupuncture at BL60 (Kunlun) produces antinociception in various models of chemical nociception in mice. The action mechanism involves the stimulation of opioid and serotonergic systems (5HT1A receptor), but does not involve adrenergic and dopaminergic systems