Análise e separação de aminoácidos naturais e não-naturais por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE)

A separação dos aminoácidos mais comumente encontrados em proteínas (L-aspartato, Lglutamato, L-asparagina, L-serina, L-glutamina, L-histidina, glicina, L-treonina, L-arginina, Lalanina, L-tirosina, L-valina, L-cistina, L-metionina, L-isoleucina, L-triptofano, L-lisina, Lfenilalanina, L-leucina) e dos cinco mais citados na literatura científica (ácido -aminobutírico – GABA, homocisteína, taurina, nitro-L-arginina e beta-alanina), utilizando-se derivativação précoluna com ortoftaldialdeído/N-acetil-L-cisteína (OPA/NAC), foi avaliada neste estudo. A separação dos aminoácidos mais comuns foi satisfatória, com exceção do par glicina/treonina, enquanto que para os demais aminoácidos não foi eficaz. Cinco amostras de sucos concentrados comerciais (laranja, uva, abacaxi, pêssego e maçã) foram avaliadas para verificar a presença de aminoácidos livres como teste para a eficiência do método. Um bom sistema de bombas, assim como boas colunas e um detector mediano são suficientes para análises em CLAE, que, aliados a um sistema simples para aquisição de dados, utilizando softwares livres, surgem como alternativa para a modernização de equipamentos fora de uso e aos caros softwares e equipamentos modernos. A estabilidade de armazenamento dos aminoácidos por um período de nove anos em solução de água/metanol (80/20) foi positiva, visto que o processo de análise e derivatização não foi afetado significativamente. Como novidade, é relatada a formação de derivativo adicional para o aminoácido glutamato. A utilização de fases móveis compostas por baixa quantidade de solventes orgânicos empregando acetona como substituinte do tetraidrofurano (THF) representou uma ótima relação de custo/benefício e baixo índice de agressão ao meio ambiente