Detection of β-lactamases in isolates of Pseudomonas aeruginosa obtained from clinical specimens taken from patients hospitalized in São Luis do Maranhão

Pseudomonas aeruginosa é um dos principais patógenos nosocomiais. Atualmente, a emergência de clones multirresistentes causando surtos hospitalares têm sido descritas em diversos países, inclusive no Brasil e consiste num grave problema. A resistência adquirida aos β-lactâmicos, que estão entre as drogas de primeira linha indicadas para o tratamento de infecções causadas por P. aeruginosa, pode ser resultante da produção de β-lactamases. Neste estudo, foram analisadas 214 P. aeruginosa isoladas de pacientes internados em hospitais de São Luís do Maranhão no período de junho de 2001 a junho de 2002. A susceptibilidade aos antimicrobianos foi avaliada pelo método de disco-difusão conforme as recomendações do NCCLS. A presença das seguintes séries de genes codificadores de β-lactamases: CARB, IMP, OXA, PSE, SHV, SPM, TEM e VIM foi determinada através da técnica da PCR em isolados que apresentaram-se positivos em testes de detecção fenotípicos ou que apresentaram perfil de resistência característico para as séries de β-lactamases citadas. Vários isolados apresentaram diferentes séries de β-lactamases, e apenas as séries de metalo-β-lactamases IMP e VIM não foram detectadas nos isolados estudados. A caracterização genotípica dos isolados produtores de β-lactamases foi realizada através de eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), após tratamento do DNA cromossômico com a enzima de restrição Spe I. Foram observados diversos genótipos entre os isolados que apresentaram a mesma série de β-lactamases, mostrando a disseminação destas enzimas nesta espécie nos hospitais de São Luís do Maranhão. Apenas os isolados produtores da enzima SPM-1 apresentaram o genótipo 3 que foi detectado nos últimos 5 meses do estudo, sugerindo o início da introdução desta metalo-β-lactamase no Maranhão. Estudos relacionados à caracterização molecular e resistência a antimicrobianos de isolados hospitalares podem fornecer informações fundamentais para auxiliar as ações dos programas de controle de infecções hospitalares. Nossos resultados mostram a importância da detecção de isolados de P. aeruginosa produtores de β-lactamases, que na maioria dos casos teriam opções terapêuticas limitadas, para prevenir o espalhamento destes e os conseqüentes surtos hospitalares.Pseudomonas aeruginosa is one of the most common and important nosocomial pathogen. β-lactams antibiotics represent the most commonly prescribed antibacterial agents for treating infections caused by P. aeruginosa. Strains with adquired resistance to β-lactams may be result from the production of β-lactamases. In this study, we analysed 214 isolates of P. aeruginosa obtained from clinical specimens taken from patients hospitalized in Sao Luis do Maranhão from June 2001 to June 2002. Susceptibility tests were determined by the disk diffusion method in accordance with NCCLS guidelines. The presence of genes encoding CARB, IMP, OXA, PSE, SIIV. SPM, TEM and VIM β-lactamases were investigated by PCR in DNA of the isolates that showed particularly resistant phenotypes or in β-lactamase producers detected by phenotypic tests. Several isolates produced different β-lactamases types. None of the isolates gave positive PCR results for sequences encoding IMP or VIM enzyme types. Genetic characterization of isolates β-lactamase producers was performed by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) using the restriction endonuclease Spel. By PFGE twenty-six genotypes were found in P. aeruginosa isolates β-lactamases producers. P. aeruginosa isolates exhibiting one of β-lactamase types (CARB, OXA, PSE, SHV or TEM) revealed several genotypes indicating the nosocomial spread of these β-lactamases. The SPM β-lactamase type was detected only in isolates belonging to genotype 3. The presence of P. aeruginosa carrying the blaspm gene in the last five months studied suggested the introduction of this metalo-β-lactamase. Genetic characterization of nosocomial isolates and antimicrobial resistance studies is important to support and enhance the efforts of the infection control programs. Our results showed that the detection of P. aeruginosa aeruginosa β-lactamase producers that have limited therapeutic options is necessary for protection against spreading nosocomial these isolates