Reproductive toxicity of triphenyltin hydroxide in mice

O grupo de compostos organoestanhosos inclui uma variedade de químicos amplamente empregados na agricultura e na indústria em geral. Sob o ponto de vista toxicológico, um dos desfechos que merece atenção diz respeito aos possíveis efeitos sobre o sistema reprodutivo de organismos em desenvolvimento. O presente estudo - dividido em 2 etapas - buscou investigar: i. efeitos do TPTH sobre o desempenho reprodutivo geral e a fertilidade após exposição in utero e durante a lactação, e ii. efeitos da exposição durante a pré-puberdade e a puberdade sobre o desenvolvimento de órgãos reprodutivos e a fertilidade. Experimento 1: Camundongos Swiss Webster foram acasalados e as fêmeas grávidas tratadas com 0, 1,875; 3,75 e 7,5mg TPTH/kg de peso corpóreo/dia por entubação gástrica do 6º dia de gravidez ao 21º dia pós-natal (PN). Ao nascimento, foi registrado o número de filhotes nascidos vivos e de natimortos. Parâmetros físicos do desenvolvimento PN foram avaliados. No dia 70PN, o teste de fertilidade foi realizado. Logo após o nascimento, três ninhadas do maior grupo de dose foram totalmente canibalizadas pela mãe. O ganho de peso materno ao longo da gestação e lactação não diferiu entre os grupos, nem houve alteração do número de filhotes ao nascimento e ao desmame. No dia 1PN, observou-se redução do peso corporal médio da prole a partir da dose de 1,87mg TPTH/kg. Não foram observadas diferenças estatísticas entre os grupos quanto ao aparecimento de marcos físicos do desenvolvimento, nem quanto ao teste de fertilidade. As mortes de algumas ninhadas (7,5mg/kg) e a redução do peso médio dos filhotes ao nascimento (a partir de 1,875 mg/kg) indicam que nas condições experimentais deste estudo, o TPTH induziu toxicidade peri-natal em camundongos. Experimento 2: Camundongos Swiss Webster foram tratados por entubação gástrica (0, 1,875; 3,75, 7,5 e 15 mg TPTH/kg de peso corpóreo/dia) nos dias 15 a 45 PN. Parâmetros físicos do desenvolvimento PN (descida de testículos e abertura de vagina) e peso corporal foram avaliados diariamente. No dia 46PN, a metade dos animais foi sacrificada. Foram determinados: peso do timo, baço e órgãos reprodutivos, número de espermatozóides e produção espermática diária. No dia 65PN, a outra metade foi avaliada quanto à fertilidade. A dose de 15mg TPTH /kg causou mortalidade de 80% dos animais. O TPTH reduziu o ganho ponderal na primeira semana do tratamento, mas houve recuperação nas semanas que se seguiram, de modo que ao final do tratamento a redução foi observada apenas com as duas maiores doses estudadas. A descida de testículos ocorreu no 21PN no grupo controle e 29PN no grupo tratado com 15mg TPTH/kg. A abertura de vagina também foi atrasada nos grupos tratados com as duas maiores doses. O número de espermatozóides na cauda do epidídimo foi 167±39 (x106) no grupo controle, 103±31 (x106) nos animais tratados com 7,5mg/kg e 30±9 (x106) na maior dose estudada. A produção espermática diária foi de 82±16 e 45±14 (x106) nos grupos tratados óleo de milho e com 15mg TPTH/kg, respectivamente. No teste de fertilidade, a razão entre o número de fêmeas que cruzaram e o número de fêmeas que deram à luz não diferiu entre os grupos. Não foram observadas diferenças quanto ao número de espermatozóides e espermátides entre os animais sacrificados após o teste de fertilidade. A maior dose de TPTH induziu acentuada mortalidade. O TPTH também retardou a descida de testículos e a abertura de vagina nos grupos tratados com doses superiores a 3,75mg TPTH/kg e diminuiu o número de espermatozóides e espermátides nas doses de 7,5 e 15mg TPTH/kg nos animais sacrificados logo após o fim do tratamento (46PN). Essa redução não foi observada, entretanto, nos animais que participaram do teste de fertilidade (65PN), indicando que os efeitos tóxicos sobre as gônadas masculinas foram reversíveis com a interrupção do tratamento.Organotin compounds are a broad-group of chemicals used in agriculture as well as in industry. Tri substituted organotins are potent biocidal compounds that are used for a variety purposes. The present study was performed to evaluate the effects of exposure to TPTH during developmental periods of utmost importance for reproductive function. Two independent experiments were performed. Experiment 1: Swiss Webster mice were mated and the day on which copulation was confirmed by the presence of a vaginal plug was designated as day ´0` of pregnancy. Pregnant mice were treated by gavage with 0; 1.875; 3.75; 7.5 mg TPTH/kg body wt /day from day 6 of gestation to day 21 of lactation. A vehicle-control group received corn oil only. The progeny was examined at birth and subsequently until weaning. Mortality, weight gain and the day of appearance of physical signs of postnatal development (ear unfolding, incisor eruption, fur development, eye opening, testis descent and vaginal opening) were evaluated. When the exposed offspring reached maturity (postnatal day 70) their reproductive capacity was assessed. Weights of reproductive organs of the exposed offspring were evaluated in adulthood. Furthermore, sexually mature male mice were assessed for their daily sperm production, sperm counts and sperm morphology. TPTH did not alter maternal weight gain during gestation and lactation. No difference between control and treated groups was observed regarding viability of the offspring at birth and during lactation. There was, however, a dose-related reduction of pup body weight in groups treated with 1.875, 3.75 and 7.5mg TPTH /kg body wt at postnatal day 1 and an increase of perinatal mortality in the group treated with 7.5mg TPTH/kg bw/day. Developmental landmarks were unaffected and no adverse effect was noted in groups treated with the two lowest doses of TPTH. The foregoing results therefore suggested that increased perinatal mortality was the most evident toxic effect noted during prenatal and lactational exposure to TPTH. Experiment 2: The effects of 0; 1.875; 3.75; 7.5 and 15 mg TPTH/kg body wt /day on male and female sexual development were investigated in the second experiment. Swiss Webster pups were treated by gavage for 30 days beginning on postnatal day 15. Mortality, weight gain and physical signs of postnatal development (testis descent and vaginal opening) were evaluated. One half of each group was killed postnatal day 46. Male and female sexual organs, thymus, spleen and liver weights recorded. Furthermore, sexually mature male mice were assessed for their daily sperm production, sperm counts, sperm transit time, sperm morphology, testosterone levels and testicular histology. When exposed animals reached maturity (postnatal day 65) their reproductive capacity was assessed (fertility test) and all parameters previously described were evaluated. TPTH induced a dose-related increase in the frequency of deaths with a high mortality in the group treated with 15 mg TPTH/kg body wt /day. A dose-related delay in testis descent was observed in groups treated with 3.75, 7.5 and 15 mg TPTH/kg body wt. A dose-related delay of vaginal opening was observed as well, but only at the two highest dose levels evaluated. Treatment with TPTH also reduced the absolute and relative weights of the reproductive organs, when these parameters were evaluated at postnatal day 46. The reduction of sperm counting [control group = 167±39 (x106); 7.5mg/kg = 103±31 (x106) and 15 = 30±9 (x106)] and of daily sperm production [0 = 82±16 (x106) and 15mg/kg = 45±14 e (x106)] was also caused by TPTH exposure. Our data indicated that peripubertal and pubertal exposure to TPTH (7.5 and 15 mg TPTH/kg) impaired development and altered gonadal function of male mice. Our data also suggested, however, that these toxic effects were reversed as exposure was discontinued