An??lises moleculares e filogen??ticas de isolados do v??rus da hepatite B em Luanda, Angola

A infec????o pelo v??rus da hepatite B (HBV) representa um grave problema de sa??de p??blica mundial, apesar da exist??ncia de uma vacina eficiente. Estima-se que cerca de 400 milh??es de indiv??duos no mundo estejam cronicamente infectados, com uma estimativa de 65 milh??es de portadores cr??nicos do HBV na ??frica. Os oito gen??tipos do HBV (A-H) apresentam distribui????o mundial caracter??stica, que reflete suas origens e o fluxo migrat??rio das popula????es infectadas. Devido ?? sua ??rea geogr??fica restrita, isolados do HBV do gen??tipo E n??o t??m sido extensivamente estudados. O objetivo do presente estudo ?? analisar a diversidade gen??tica do HBV entre indiv??duos positivos para o HBsAg em Luanda, Angola. Um total de 31 de 43 amostras foram amplificadas com sucesso para o genoma completo do HBV (aproximadamente 3,200 pares de bases) por rea????o em cadeia da polimerase (PCR). Quinze genomas completos do HBV puderam ser sequenciados diretamente a partir de seus produtos de PCR. Quatorze deles foram classificados como HBV/E, e um como HBV/A/A1. Conforme vem sendo descrito para o gen??tipo E, as dist??ncias gen??ticas entre as amostras foram baixas: 1,0% para o genoma completo; 0,7% para a pr??-S/S; 0,9% para a polimerase, 1,7% para a pr??-C/C e 1,2% para a ORF X. An??lises nucleot??dicas da regi??o pr??-S/S/Pol, demonstraram que 3 pacientes com coinfec????o HIV-HBV sob terapia (HAART), possu??am muta????es de resist??ncia a lamivudina e em um deles verificou-se tamb??m uma muta????o de resist??ncia ao adefovir. Em rela????o ?? regi??o pr??-C/C, verificou-se em 3 das amostras presen??a da dupla muta????o A1762T-G1764A do BCP, associada ou n??o ??s substitui????es G1896A e G1899A. Dentre as 5 amostras clonadas com sucesso, 4 foram classificadas como HBV/E E, e uma como HBV/A/A1. A an??lise filogen??tica das subpopula????es evidenciou assinaturas moleculares e dele????es espec??ficas de cada popula????o. Este estudo poder?? contribuir para um maior conhecimento sobre a variabilidade gen??tica dos isolados de HBV circulantes em Angola, bem como para elucidar caracter??sticas sobre a patog??nese e o curso cl??nico da doen??a que visem ?? ado????o de medidas preventivas e de controle da infec????oHepatitis B virus (HBV) infection is one of the major global human health problems, despite the introduction of vaccination programs. It is estimated that more than 400 million people are chronically infected with HBV worldwide, among then 65 million are living in Africa. The sequence heterogeneity of HBV isolates has led to the classification of HBV into eight genotypes, A to H, based on full-length genomic divergence of more than 8%. Genotype E is mainly found in Sub-Saharan Africa. Due to their restricted geographic prevalence area, HBV genotype E isolates have not been extensively studied with regard to genetic variability. The aim of this study was to analyze the genetic diversity of HBV complete genome from HBsAg positive individuals in Luanda, Angola. From a total of 43 samples, 31 were amplified successfully for the HBV complete genome (approximately 3.200 bp) by polymerase chain reaction (PCR). Fifteen HBV complete genomes were sequenced directly from their PCR products. For them, fourteen were classified as HBV/E, and one as HBV/A/A1. The genetic distances between the samples were low, as described for genotype E: 1.0% for the entire genome, 0.7% for pre-S/S, 0.9% for polymerase, 1.7% for pre-C/C and 1.2% for ORF X. Pre-S/S/Pol region nucleotide sequence analysis from 3 patients with HIV-HBV coinfection under HAART therapy, presented lamivudine resistance mutations and one of these 3, presented also adefovir resistance mutation. Regarding the region of the pre-C/C, it was found in 3 samples a BCP double mutation A1762T-G1764A, with or without G1896A and G1899A substitutions. Subpopulations analysis of five different samples, 4 classified as HBV/E, and one as HBV/A/A1 revealed molecular signatures specific to each population. This study will contributes to a better knowledge about HBV genetic variability strains circulating in Angola, and to elucidate the molecular features and clinical characteristics aiming the adoption of preventive measures and infection control