American tegumentar leishmaniose

Durante os anos 50, houve uma epidemia de peste bub??nica no Brasil. Em busca do reservat??rio, cerca de 60.000 roedores foram coletados, examinados e taxidermizados. Todos os animais foram arquivados no Museu Nacional do Rio de Janeiro. Como muitos roedores eram de ??reas onde a leishmaniose e a peste eram concomitantes, decidimos investigar se esses animais poderiam ser reservat??rio de Leishmania. Examinamos um total de 20 animais de Baturit??, Cear??, e 19 da Ilha Grande, Rio de Janeiro. Essas duas ??reas foram escolhidas por terem hist??ria de leishmaniose epidemiologicamente bem estudada. Fragmentos de pele de 1mm3 foram coletados de orelha, cauda e p??s de cada animal. Fragmentos de lesao cut??nea, presente em tr??s roedores, tamb??m foram coletados. O DNA gen??mico foi isolado, usando-se um kit para isolamento de DNA tecidual. Oligonucleot??deos que se associam ?? origem de replica??ao das duas fitas das mol??culas de minic??rculo foram usados em hot start PCR, amplificando a regiao conservada do minic??rculo de kDNA. Os produtos amplificados foram analisados pela eletroforese em gel de agarose corado pelo brometo de et??dio e visualizados sob luz UV. Todos os produtos foram aplicados em membrana de nylon usando-se aparelho de dot blot e hibridizados com sonda de L. Braziliensis M2903 e L.amazonensis L575. Pela PCR, Leishmania amazonensis foi encontrada L575. Pela PCR, Leismania amazonensis foi encontrada na orelha de dois animais, um Oryzomys subflavus e um Thrichomys apereoides. A hibrida??ao com sonda de L. braziliensis foi negativa em todos os casos. Ambos os roedores positivos eram de Baturit??. A infec??ao por L. amazonenesis ??, primariamente, uma zoonose, e pode ser encontrada em grande variedade de hospedeiros entre animais silvestres, inclusive roedores, marsupiais e raposas. Indica a viabilidade de reconstruir a hist??ria das leishmanioses pela PCR, o que pode favorecer o entendimento dos eventos hist??ricos que influenciaram a leishmaniose tegumentar americana no Brasil.During the fifities there was an epidemics of plague in Brazil. Seeking for reservoirs, around 60000 rodents were colected, examined and taxidermized. All animals were stored in the archives of the Nacional Museum of Rio de Janeiro, Brazil. Since many of the rodents were from areas where leishmaniasis was concomitant, we decided to investigate if these animals would be a reservoir for Leishmania. We examined 20 animals from Baturit??, Cear??, and 19 from Ilha Grande, Rio de Janeiro. These two areas were chosen because there had been a previous epidemiological study of leishmaniasis. Skin fragments of 1 mm3 from the ear, tail and foot from each animal were collected. In addition, a fragment from a cutaneous lesion, present in three of the animals, was also collected. Genomic DNA was isolated by using the QIAmp tissue kit. Oligonucleotides that anneal to the origin of replication of both strands of the minicircle molecules were used in a hot start PCR, amplifying the conserved region of the minicircle kDNA. The amplified products were analysed by agarose gel eletrophoresis, ethidium bromide staining, and were visualized under UV light. All products were applied to a nylon membrane using a dot-blot apparatus and hybridized with a preamplified product of L. braziliensis M2903 strain or L. amazonensis L575 as probe. Leishmania amazonensis was found by PCR in the ear of two animals, one Oryzomys subflavus and one Thrichomys apereoides. Hybridization with the L. braziliensis probe was negative in all cases. Both animals were from Baturit??. L amazonensis infection is primarily a zoonosis, found in a wide range of hosts among wild animals, including rodents, marsupials and foxes. The results of this study indicate that it is likely to reconstruct the history of leishmaniasis by PCR and that it might be possible to understand the historical events that have influenced American leishmaniasis in Brazil