Evaluation of the profile of antimicrobial resistance and the presence of the genes mecA and qacA/B in staphylococcus spp. isolated from minas frescal type cheese

Diversos relatos indicam que queijos Minas Frescal comercializados no Brasil são amplamente contaminados, sendo o gênero Staphylococcus spp. incriminado em diversos surtos de toxinfecção alimentar. Os objetivos deste estudo são a pesquisa de características fenotípicas e genotípicas de resistência a antimicrobianos de Staphylococcus spp. isolados a partir de queijo Minas Frescal, verificando a presença dos genes mecA e qacA/B através da técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR). Estes isolados, caracterizadas como estafilococos coagulase positiva e estafilococos coagulase negativa por Freitas (2005), neste estudo passaram por verificação de sua pureza, através de características macroscópicas das colônias em crescimento em Triptic Soy Agar, coloração de Gram, prova da catalase e da coagulase. Após a seleção de culturas puras de estafilococos foi realizado teste de suscetibilidade a antimicrobianos (mupirocina, ampicilina, tetraciclina, clindamicina, sulfazotrim, norfloxacina, cefotaxima, piperacilina+tazobactam, meropenem, penicilina G, cefepima, cloranfenicol, gentamicina, eritromicina, oxacilina e cefoxitina), extração de DNA e pesquisa dos genes mecA e qacA/B através da reação em cadeia da polimerase. Os resultados foram que apenas 14 (14,7%) dos isolados analisados pelo antibiograma se mostraram sensíveis a todos os antibióticos testados. Encontrou-se 27 (28,4%) dos isolados multiresistentes e suscetíveis à meticilina e 15 (15,8%) eram multiresistentes e resistentes à meticilina. O gene mecA foi detectado em 21 (22,1%) dos 95 isolados pesquisados, e dentre estes, 9 (9,5%) apresentaram-se como resistentes pelo teste de suscetibilidade a antimicrobianos (incluindo dois isolados coagulase negativos). Dentre os isolados 74 (77,9%) não apresentaram o gene mecA e 6 (6,3%) apresentaram-se resistentes à meticilina pelo antibiograma. Foi utilizada estatística descritiva pelo cálculo de porcentagens com os dados obtidos na pesquisa. Demonstramos através desta pesquisa que o gene qacA/B não estava presente em nenhum dos isolados de estafilococos provenientes de queijo Minas Frescal. Os queijos Minas Frescal analisados neste estudo possuem isolados de Staphylococcus spp. com o potencial de resistir a tratamentos de antibioticoterapia caso consigam causar infecção ao consumidor através da ingestão, porém elimináveis dos ambientes de produção de alimentos pelo uso dos agentes desinfetantes a base de quaternários de amônio.Several reports indicate that cheese commercialized in Brazil are widely contaminated with the Staphylococcus spp. incriminated in several outbreaks of food poisoning. The objectives of this study are to search for phenotypic and genotypic antimicrobial resistance of Staphylococcus spp. isolated from Minas Frescal type cheeses, verifying the presence of the mecA gene and qacA/B using the technique of polymerase chain reaction (PCR). These isolates were characterized as coagulase-positive and coagulase-negative staphylococci by Freitas (2005) and this study began by checking its purity by means of macroscopic features of colonies growing in Triptic Soy Agar, Gram stain, tests of catalase and coagulase. After selection of pure cultures of staphylococci, these isolates were tested for susceptibility to antimicrobials (mupirocin, ampicillin, tetracycline, clindamycin, sulfazotrim, norfloxacin, cefotaxime, piperacillin + tazobactam, meropenem, penicillin G, cefepime, chloramphenicol, gentamicin, erythromycin, oxacillin and cefoxitin ), DNA extraction and research of the genes mecA and qacA/B by polymerase chain reaction. The results were that only 14 (14.7%) isolates analyzed by antibiotic susceptibility were sensitive to all antibiotics tested. 27 (28.4%) of multiresistant strains were methicillin-susceptible and 15 (15.8%) were multidrug resistant and resistant to methicillin. The mecA gene was detected in 21 (22.1%) of 95 isolates studied, and of these, nine (9.5%) were resistant to the antimicrobial susceptibility testing (including two isolates of coagulase-negative). Among the isolates, 74 (77.9%) showed the mecA gene and 6 (6.3%) were resistant to the antibiotic methicillin. Descriptive statistics were used for calculating percentages with datas obtained in this search. We demonstrated through this research that the gene qacA/B were not present in any of staphylococcal isolates from Minas Frescal type cheeses. The Minas Frescal type cheese analyzed in this study had Staphylococcus spp. with the potential to resist antibiotic treatment if they can cause infection to consumer through ingestion, but eliminable of the environments of food production through the use of disinfecting agents based on ammonium quaternar