Efeitos do exercício físico sobre parâmetros metabólicos em camundongos obesos e nocautes para o receptor B2 de cininas

O Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2) é um grupo de doenças metabólicas caracterizado por uma hiperglicemia crônica ocasionada por uma ação insulínica insuficiente e consequente redução na translocação do transportador de glicose do tipo 4 (GLUT4). Normalmente está associada à inatividade física, envelhecimento e aumento de gordura corporal. O DM2 e a obesidade geram um processo inflamatório, responsável por disfunção endotelial e geração de maior resistência à insulina. Modificações no estilo de vida, como a realização de exercícios físicos, poderiam reverter esses quadros, constituindo uma compreensiva estratégia para o tratamento e prevenção dessas patologias. O exercício físico (EF) conta com mecanismos que promovem maior translocação de GLUT4, entre eles a maior liberação e atividade de bradicinina (BK) e óxido nítrico (NO) resultando em melhor controle glicêmico. Porém, ainda não está esclarecido a dose ideal do EF, como de intensidade e duração que potencializem estes benefícios. Assim, o objetivo do Estudo 1 foi analisar o efeito da intensidade e duração do EF na liberação de óxido nítrico, citocinas e conteúdo de GLUT4 em camundongos. Já o Estudo 2 objetiva investigar o papel da BK na disponibilidade de NO e o papel deste na concentração de GLUT4 com e sem a presença da obesidade e da resistência à insulina. Para tanto, no Estudo 1 utilizamos 16 camundongos C57BL/6, em idade adulta (7-8 meses), separados em 4 grupos experimentais, 1) sessão controle (CON); 2) sessão de natação de baixa intensidade e duração (3% peso corporal PC/20min), 3) alta intensidade (6%PC/20min), 4) natação de maior duração (3%PC/40min). A amostra do Estudo 2 foi composta de 16 camundongos de ambos os sexos (3 fêmeas e 13 machos) com meia idade (8-12 meses), sendo 4 obesos resistentes à insulina (ob/ob), 4 heterozigotos não resistentes à insulina (OB/ob), 4 nocautes para o receptor B2 de cininas e obesos (Bk2r-/-/ob) e 4 Bk2r -/-/OB (magros); todos realizaram uma sessão de 20min de exercício a uma intensidade correspondente ao limiar de lactato (LL). Após as sessões todos os animais foram sedados e eutanasiados para coleta de sangue e de tecido muscular (gastrocnêmio) para posteriores análises. Os resultados do Estudo 1 demonstraram o benefício da intensidade do EF na liberação de NO e no conteúdo de GLUT4, com maior NO (7.6 0.3μM p≤0.05) comparado com baixa intensidade e CON (5.3 0.7 e 4.8 0.7μM respectivamente), e maior GLUT4 em relação ao CON (≅10.44pg/mL - 29.2 4,1 vs 18.8 1.1 pg/mL), o que não foi observado em comparações para se identificar o benefício da duração do EF. Observamos no Estudo 2 que a ausência do receptor B2 reduz a disponibilidade de NO em ambos os grupos (p≤0.05), Bk2r-/-/ob (8.3 1.8μM) versus ob/ob (20.1 5.4μM) e Bk2r-/-/OB (19.4 4.6μM) versus OB/ob (39.1 8.7μM), além de menor GLUT4 nos magros (Bk2r-/-/OB 24.2 1.8 e OB/ob 35.4 2.3pg/mL), essas diferenças também foram observadas na presença da obesidade e resistência à insulina. Os grupos Bk2r-/- também apresentaram maiores concentrações de TNFα muscular. Deste modo, o presente estudo demostra primeiramente que o EF realizado de forma intensa gera maior disponibilidade de NO e aumento na concentração de GLUT4 em animais convencionais, além de demonstrar que o receptor B2 de cininas, bem como a presença obesidade e a resistência à insulina influenciam de forma direta a liberação de NO e no conteúdo de GLUT4.Type 2 Diabetes (T2D) is a group of metabolic diseases characterized by chronic hyperglycemia caused by insufficient insulin action and a consequent reduction in the translocation of glucose transporter type 4 (GLUT4). It is usually associated with physical inactivity, aging and increased body fat. The T2D and obesity promote an inflammatory, process responsible for generating endothelial dysfunction and insulin resistance. Changes in lifestyle such as physical exercises, could reverse these conditions, constitute a comprehensive strategy for the treatment and prevention of these diseases. Physical exercise (PE) has mechanisms that promote increased of GLUT4 translocation, among them the increased release and activity of bradykinin (BK) and nitric oxide (NO) resulting in better glycemic control. But it is still unclear the "optimal dose" of PE, such as intensity and duration that enhance these benefits. Thus the aim one study was to analyze the effect of intensity and duration of PE in the release of nitric oxide, cytokines and GLUT4 translocation in mice. The study 2 to investigate the role of NO in the availability of BK its role in the GLUT4 concentration with and without the presence of obesity and insulin resistance. Used for the one study 16 C57BL/6 mice (7-8 months), separated into four experimental groups: 1) control session (CON); 2) short bout at low intensity (3% of body weight BW/20min); 3) short bout at high intensity (6% of BW/20min); 4) long-term session at low intensity (3%BW/40min). The sample of two study consisted of 16 mice (3 females and 13 males) with middle-aged (8-12 months), and 4 insulin-resistant obese (ob/ob), 4 non-insulin resistant heterozygous (OB/ob), 4 knockouts of BK B2 receptors and obese (Bk2r-/-/ob) and 4 Bk2r-/-/OB, all animals subject a session of 20 minutes of exercise at an intensity corresponding to the threshold lactate (LL). After the sessions, all animals were sedated and euthanized to collect blood and muscle tissue (gastrocnemius) for further analysis. The results of a one study demonstrated the benefit of the intensity of the PE in releasing NO and the GLUT4 content, more NO (7.6 0.3μM P ≤ 0.05) compared to low intensity and CON (5.3 0.7 and 4.8 0.7μM respectively) and higher GLUT4 in relation the CON (≅ 10.44pg/mL - 29.2 4.1 vs 18.8 1.1 pg/ml) which was not observed in comparison to identify the effective duration of PE. Observed in two study the absence of the B2 receptor reduces the availability of NO in both groups (P ≤ 0.05), Bk2r-/-/ob (8.3 1.8μM) versus ob/ob (20.1 5.4μM) and Bk2r-/-/OB (19.4 4.6μM) versus OB/ob (39.1 8.7μM), and lower GLUT4 in lean (Bk2r-/-/OB 24.2 1.8 e OB/ob 35.4 2.3pg/mL), these differences were also observed in the presence of obesity and insulin resistance. The groups Bk2r-/- also showed higher concentrations of TNF muscle. Thus, this study shows that the first PE performed intensively generates greater availability of NO and increase in concentration of GLUT4 in conventional mice, and demonstrate that the BK B2 receptor, as well as the presence of obesity and insulin resistance influence directly NO release and the GLUT4 content