Estudo comparativo de diagnóstico e achados citológicos da tricomonose em uma amostragem populacional do Distrito Federal

A tricomonose é uma doença sexualmente transmissível, causada por um protozoário flagelado do trato geniturinário, Trichomonas vaginalis. Implicações desta doença na saúde do indivíduo vão além de suas decorrências patológicas diretas, do agrave aos sistemas de saúde e de fatores culturais e socio-econômicos. A infecção por T. vaginalis predispõe os indivíduos a infecções virais, como HIV, devido à exacerbada inflamação local, a leucorréia. Nas mulheres, a tricomonose está associada ao desenvolvimento de doenças inflamatórias pélvicas atípicas e infertilidade. Além disso, nas gestantes, a tricomonose pode implicar a predisposição a ruptura prematura das membranas placentárias e parto prematuro. O diagnóstico desta infecção é portanto importante para correto tratamento, e usualmente realizado por métodos citológicos. O método universal é o Papanicolaou, por permitir o diagnóstico de várias infecções genitais ao mesmo tempo. No entanto, métodos mais sensíveis vêm demonstrando a falta de precisão dos métodos citológicos. Neste trabalho, objetivamos caracterizar o status de diagnóstico para a tricomonose em uma população grande e aleatória de mulheres do Distrito Federal. Foram coletadas amostras de 1008 pacientes com ou sem sintomas de vaginite, sendo processadas através de técnicas como, a PCR específica (teste baseado em DNA), a cultura, o exame a fresco e o Papanicolaou. Nossos dados mostram que o Papanicolaou induziu erros de diagnóstico, aproximadamente 40%, entre falsos-positivos e falsos-negativos. Reavaliando os exames citológicos, verificamos que fragmentos celulares oriundos de citólise focal induzida por bactérias podem facilmente serem confundidos com formas irregulares do parasito usualmente detectadas. Utilizando a PCR como padrão comparativo de diagnóstico, o Papanicolaou demonstrou uma sensibilidade de 60.7%, indicando ser portanto um exame inadequado para o diagnóstico da tricomonose. Considerando ainda que o diagnóstico citológico de algumas infecções genitais deva ser mais delicado, este trabalho também deve alertar a comunidade científica e médica no que se refere o diagnóstico de DSTs. As perspectivas seguintes e imediatas decorrem do interesse de se caracterizar a variabilidade genética intraespecífica dos 89 isolados deste trabalho. Técnicas de PCR/RFLP e de sequenciamento de DNA estão sendo utilizadas nas regiões ribossômicas do genoma do protozoário para este propósito. Por fim, nossos dados preliminares detectam variabilidade genética intraespecífica dentre os isolados de T. vaginalis, e, também comparativamente a outros trabalhos da literatura, mostram que as regiões ribossômicas ITS e IGS são interessantes para estudos de variabilidade genética intraespecífica ou para filogenia dos tricomonadídeos.Trichomonas vaginalis is common flagellated protozoan causing vaginitis, exocervicitis, and uretritis in women, the main sexually transmitted disease in humans worldwide. Besides its pathological implication being a risk factor for the transmission of human immunodeficiency virus, reproductive complications are observed in women. Routine diagnostic usually depends on microscopic identification of the parasite in stained or wet-mount preparations, methods that demonstrate low sensitivity. Even specific culture, a gold standard method, can fail. In this study, we evaluate comparative diagnostic methods of tricomoniasis, using techniques more sensible than usual, like culture and specify PCR, with two sets of specific primers. For this study, vaginal and cervical swabs were collected from 1008 patients with and without symptomatic vaginitis in the area of Brasilia and Federal District, Capital of Brazil. All clinical specimens were processed for wet-mount, Pap-smear, specific culture, and PCR. We reported that Papanicolaou induces error in diagnosis about 40% among false-positive and false-negative findings. Comparing to PCR, sensitivity of Papanicolaou was only 60.7%. Concluding, the Papanicolaou makes the universal cytological method inaccurate and inappropriate for diagnosis of trichomonosis. Because there is confusion in the appearance of irregular-shaped parasites and cellular fragments generated from bacterial focal cytolysis, several cases of misdiagnosis were observed. Our data advice that current diagnosis can not be adequate for others sexually transmitted diseases in which cytological findings could be more imprecise or subjective. Our current perspective is to use techniques of PCR/RFLP and DNA sequencing in the analysis of ribosomal DNA regions of the 89 clinical isolates of T. vaginalis in attempt to seek for concordance between genetic variability and virulence, clinical signs and symptoms, and cytological findings. Finally, our preliminary results demonstrate considerable intraspecific genetic variability among clinical isolates of T. vaginalis, and according to the literature, ITS and IGS ribosomal regions become important for studies concerning intraspecific genetic variability and phylogeny of trichomonads