Study of the diversity of micro-organisms associated with colonial ascidians (Tunicata, Ascidiacea)

A simbiose com micro-organismos à bem conhecida em diversos tÃxons de invertebrados marinhos. No entanto, pouca ou quase nenhuma informaÃÃo hà sobre essa interaÃÃo para os animais do litoral brasileiro. Micro-organismos tem sido apontados ainda como os responsÃveis pela produÃÃo de compostos com atividades biolÃgicas interessantes presentes em animais como as ascÃdias. Diante disso, o objetivo da presente pesquisa foi o de estudar a microbiota associada a superfÃcie externa de ascÃdias coloniais, com Ãnfase em cianobactÃrias simbiontes, classificando, conhecendo o perfil de diversidade da comunidade e identificando associaÃÃes especÃficas entre componentes da microbiota e ascÃdias hospedeiras. O estudo foi realizado com duas espÃcies de ascÃdias: Didemnum galacteum e Cystodytes sp., coletadas na regiÃo oeste do Estado do Cearà (Brasil), na praia dos Dois Coqueiros e Porto do PecÃm, respectivamente. A microbiota foi analisada inicialmente por meio da microscopia Ãtica e posteriormente por tÃcnicas moleculares como: eletroforese em gel de gradiente desnaturante (DGGE) e biblioteca do 16S rRNA. A anÃlise microscÃpica evidenciou uma comunidade composta por cianobactÃrias e diatomÃceas. Os resultados do DGGE mostraram o perfil da comunidade em termos de Unidades TaxonÃmicas Operacionais (UTOs), com a maior diversidade de UTOs apontada na ascÃdia Didemnum galacteum. A microbiota presente na Ãgua do mar onde os espÃcimes foram coletados foi comparada com a microbiota da superfÃcie da tÃnica da ascÃdia, e os resultados evidenciaram que o nÃmero de UTOs à maior na Ãgua do mar e que a ascÃdia apresenta uma microbiota especÃfica. A comunidade microbiana analisada pela biblioteca do 16S rRNA revelou a dominÃncia de bactÃrias nas duas bibliotecas analisadas. Dentre as bactÃrias o tÃxon dominante em todos os casos foi Proteobacteria, com Alphaproteobacteria para a ascÃdia Didemnum galacteum e Gammaproteobacteria para a ascÃdia Cystodytes sp. Outros representantes como Bacteroidetes, Planctomycetes, Actinobacteria, Cyanobacteria e BactÃrias nÃo cultivÃveis foram evidenciadas na microbiota de Didemnum galacteum, porÃm em menor proporÃÃoThe symbiosis with microorganisms is well known for many marine invertebrate taxa. Despite that, information about these interactions along the Brazilian coast are scanty or even nonexistent. Microorganisms have also recognized as the real producers of interesting natural compounds extracted from marine invertebrates, such as ascidians. With that in mind, the goal of the present study was to evaluate the microbiota associated to colonial ascidians, focusing on symbiotic cyanobacterias, then classifying, estimating the community diversity, and identifying specific interactions between the microbiota and its hosts. This study assessed two ascidians species Didemnum galacteum and Cystodytes sp. collected in the west coast of Ceara state (Brazil), at Dois Coqueiros beach and port of PecÃm, respectively. The microbiota was analyzed initially through optical microscopy and subsequently by molecular techniques such as denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) and 16S rRNA library. The microscopic analysis showed a community comprising cyanobacteria and diatoms. DGGE results presented the community profile in terms of Operational Taxonomic Units (OTUs), pointing out Didemnum galacteum as the most diverse. The microbiota in the seawater where specimens were collected was compared to that from the ascidiansâ tunic surfaces, and results showed higher number of OTUs in the water, and a more specific microbiota in ascidians. The microbiota community studied by 16S rRNA library revealed dominance of bacteria in both libraries assessed, in which Proteobacteria taxon prevailed with either Alphaproteobaccteria in Didemnum galacteum, and Gammaproteobacteria in Cystodytes sp. Others, such as Bacteroidetes, Planctomycetes, Actinobacteria, Cyanobacteria and uncultured bacteria were evident in Didemnum galacteum, but in a lesser proportio