Evaluation of the effect of sulfated polysaccharides extracted from the microalgae Dunaliella tertiolecta as immunostimulant in juvenile shrimp Litopenaeus vannamei

A aquicultura tem se tornado uma das atividades que mais se expande mundialmente, tendo o cultivo de microalgas e a carcinicultura grande contribuiÃÃo para este avanÃo. O presente trabalho teve por objetivo cultivar a microalga marinha Dunaliella tertiolecta e extrair seus polissacarÃdeos sulfatados do meio de cultivo e biomassa, bem como avaliar os efeitos da administraÃÃo destes polissacarÃdeos diretamente na Ãgua de cultivo de pÃs-larvas (plâs) e juvenis do camarÃo marinho Litopenaeus vannamei. Ao longo dos cultivos da microalga foram avaliados alguns parÃmetros de crescimento e desenvolvimento da cultura, da qual foram obtidos o meio de cultivo e a biomassa para a extraÃÃo dos polissacarÃdeos sulfatados. Estes polissacarÃdeos foram administrados diretamente na Ãgua, nas concentraÃÃes de 0,5; 1 e 2 mg/L, para as plâs de L. vannamei, as quais foram submetidas ao teste de estresse salino freqÃentemente aplicado nas fazendas de camarÃes para verificar a qualidade das plâs. Os juvenis de camarÃo tambÃm foram expostos Ãs mesmas concentraÃÃes de polissacarÃdeos por um perÃodo de 5 dias, em condiÃÃes de laboratÃrio. Em seguida, foram coletadas amostras da hemolinfa dos animais para a anÃlise de alguns parÃmetros hematoimunolÃgicos, como a contagem total de hemÃcitos (CTH), atividade da enzima fenoloxidase (PO), capacidade de aglutinaÃÃo da hemolinfa e concentraÃÃo total de proteÃnas. Os resultados mostraram um excelente desenvolvimento da microalga D. tertiolecta, alcanÃando um rendimento mÃximo de 6,67 g.L-1 em biomassa seca, e em 10 L de meio de cultivo, dos quais foram obtidos 2,3 g de polissacarÃdeos sulfatados brutos. As plâs apresentaram maior resistÃncia ao teste de estresse salino, quando submetidas à concentraÃÃo de 0,5 mg/L de PS, onde ao final do teste apenas 12,5% do indivÃduos morreram, enquanto a menor mortalidade acumulada nos juvenis (6,7%) foi observada apÃs a administraÃÃo da maior dose. A anÃlise dos imunoparÃmetros nÃo apresentou muitas variaÃÃes com exceÃÃo da contagem total de hemÃcitos e da concentraÃÃo de proteÃnas na hemolinfa, os quais foram significativamente reduzidos com o aumento da dose de polissacarÃdeos na Ãgua. Estudos futuros, principalmente histolÃgicos, serÃo uma alternativa para esclarecer a possÃvel migraÃÃo de hemÃcitos para as brÃnquias dos animais expostos as maiores concentraÃÃes de polissacarÃdeos na ÃguaAquaculture is one of the activities that most expands around the world and microalgae such as shrimps cultures have a great contribution into this progress. The aim of this study was the culture of the marine microlgae Dunaliella tertiolecta and extract its sulfated polysaccharides from the biomass and from the culture medium as well as to evaluate the effects of polysaccharides administration directly into the cultivation water of Litopenaeus vannamei shrimpâs post-larvae and juveniles. During microalgae cultivation some growth parameters and culture development were evaluated, and the sulphated polysaccharides were extracted from biomass and the culture medium. These polysaccharides were directly administrated into the water, in the concentration of 0.5; 1.0 and 2.0 mg L-1 to plâs of L. vannamei, wich were submitted to a saline stress often applied to verify the quality of plâs in the most of shrimps farms. The juveniles were exposed to the same concentration of the polysaccharides in a five days period in laboratory conditions. Then, we collected the animals haemolymph to analyze some hematoimmunological parameters, like total haemocyte count (THC), phenoloxidase enzime activity (PO), haemolymph aglutination capacity and total protein concentration. The results showed an excelent development of the microalgae D. tertiolecta, reaching a maximum yield of 6.67 g L-1 in dry biomass and in 10 L of culture medium, from wich were obtained 2.3 g of gross sulphated polysaccharides. The plâs presented high resistance to the saline stress, when submitted to a 0.5 mg L-1 concentration of PS, and at the end of the test only 12.5% of individuals died, while in the juveniles the lower accumulated mortality was 6.7% when the higher dosage of PS was administrated. The analysis of the immunoparameters did not show any variation except the haemocyte total count and haemolymph protein concentration, wich were significantly reduced within the increase of polysaccharides dosage in the water. Future histological studies can be an alternative to reveal the possible haemocytes migration to the animals gills exposed to higher polysaccharides concentration in the wate