Evaluation of Polymerase Chain Reaction(PCR) in stool samples for diagnosis of shistosomiasis in low endemicity region in state of CearÃ.

A esquistossomose ainda à um problema de saÃde pÃblica no Brasil, amplamente disseminada nas regiÃes sudeste e nordeste. O diagnÃstico laboratorial dessa doenÃa à realizado principalmente atravÃs de mÃtodos diretos que detectam os ovos nas fezes, atravÃs da microscopia e por mÃtodos indiretos, que se baseiam na determinaÃÃo e identificaÃÃo de antÃgenos, anticorpos e fragmentos especÃficos de DNA que estÃo associados à infecÃÃo por Schistosoma mansoni. Nesse estudo, objetivamos avaliar a reaÃÃo em cadeia da polimerase (PCR) para diagnÃstico da esquistossomose mansoni, em indivÃduos da localidade de Planalto do Cajueiro, uma Ãrea de baixa endemicidade, em Maranguape- CearÃ. Realizamos o mÃtodo de ELISA, para detecÃÃo de anticorpos IgG contra antÃgenos de verme adulto de S. mansoni, e a coproscopia, pelos mÃtodos de Kato-Katz e de Lutz, para detecÃÃo de ovos de S. mansoni e de outros parasitos. Diante dos resultados obtidos nesses mÃtodos, selecionamos 56 amostras de fezes, dentre as 125 analisadas, que compuseram os seguintes grupos: Grupo I - ELISA reativo/Outros parasitos (+) ; Grupo II- ELISA reativo/Outros parasitos (-); Grupo III- ELISA nÃo reativo/ Outros parasitos (+) ; Grupo IV-ELISA nÃo reativo/Outros parasitos (-); Grupo V- ELISA Reativo/Coproscopia para S. mansoni (+). Os parÃmetros da PCR seguiram o protocolo de Pontes et al., 2002. Do Grupo I, 02 das 10 amostras foram positivas na PCR; do Grupo II, 04 das 10 amostras foram positivas na PCR e no Grupo III, 01 das 07 amostras foi positiva no PCR. Dentre as 10 amostras do Grupo IV, 01 amostra foi positiva no PCR e no Grupo V, 13 das 19 amostras foram positivas no PCR. Dos 39 indivÃduos que apresentavam reatividade pelo ELISA, o exame parasitolÃgico, realizado pela tÃcnica de rotina, mÃtodo de Kato-Katz, foi positivo em 06 amostras e a PCR em 19 amostras. Ao comparar os resultados obtidos no Grupo V, com o mÃtodo de Kato-Katz, observa-se que este detectou 06 indivÃduos, enquanto PCR detectou 13. Ao compararmos PCR ao mÃtodo do Gradiente SalÃnico, observa-se que o Gradiente SalÃnico detectou 09 indivÃduos, enquanto PCR detectou 11. Ao compararmos PCR ao HelmintexÂ, verificamos que o Helmintex detectou 10, enquanto PCR detectou 08 amostras. Diante disso, concluÃmos que a PCR à mais uma ferramenta importante para melhorar a sensibilidade na detecÃÃo do parasito nas fezes, sendo indispensÃvel à associaÃÃo dos vÃrios mÃtodos disponÃveis, com intuito de alcanÃar o diagnÃstico real da doenÃa.Schistosomiasis is still a public health problem in Brazil. The infection is widespread in southeast and northeast. The laboratorial diagnosis of schistosome infection has been based on direct coproscopic examination and by indirect methods for detection of antigen, antibodies and specific DNA fragments that are associated with Schistosoma mansoni infection. The aim of the present study was to evaluate polymerase chain reaction (PCR) designed for detection of Schistosoma mansoni DNA in individuals from a low endemic area in Cearà state. The study was conducted in the Planalto do Cajueiro, Maranguape, CearÃ, Brazil. In the laboratory performed the ELISA for detection of IgG antibodies against adult worms antigen of S. mansoni, and stool examinations (Kato-Katz, Lutz, Saline gradient and Helmintex methods), considering the results obtained, for distribution of 56 stool samples selected among the 125 examined, in the following groups: Group I - ELISA reactive / Others parasites (+ ), Group II- ELISA reactive / Others parasites (-), Group III- ELISA non reactive / Others parasites (+), Group IV- ELISA non reactive / Others parasites (-), Group V- ELISA reactive / Coproscopic examination S. mansoni (+).The PCR was carried out according to a protocol described by Pontes et al.(2002) . Group I, 02 of 10 samples were positive in PCR; Group II, 04 of 10 samples were positive by PCR and in Group III, 01 of 07 samples were positive in PCR. Among the 10 samples of Group IV, 01 was positive in PCR and Group V, 13 of 19 samples were positive in PCR. Among the 39 individuals who showed reactivity by ELISA, 06 samples were positive in coproscopic examination and PCR was reactive in 19 samples. Comparing the results in Group V, with the Kato-Katz, this method detected 06 individuals, while PCR detected 13 individuals were positive. By comparing the PCR of Saline gradient, it is observed that the Saline gradient detected 09 individuals, while PCR detected 11. When comparing PCR to HelmintexÂ, we found that the Helmintex detected 10, while PCR detected 08 samples. We conclude that PCR is an important tool to improve the sensitivity in detecting S. mansoni infection in low endemic areas. We emphasize that is very important associate the exams in order to achieve the real diagnosis of the disease