Study of the mechanisms involved in effect of bisphosphonate dissodic alendronate in experimental periodontal disease

A periodontite, a principal causa de perda de dentes em adultos, à uma doenÃa inflamatÃria onde ocorre perda do osso alveolar e destruiÃÃo das fibras do ligamento periodontal. Tanto as bactÃrias periodontopatogÃnicas como os fatores provenientes do hospedeiro sÃo necessÃrios para o desenvolvimento e progressÃo desta patologia. Os bisfosfonatos constituem uma nova classe de drogas, os quais inibem a reabsorÃÃo do osso causando alteraÃÃes morfolÃgicas ou apoptose nos osteoclastos. O objetivo do presente estudo foi investigar os mecanismos envolvidos no efeito de um bisfosfonato Alendronato DissÃdico (AD) na doenÃa periodontal experimental (DPE), comparando seus efeitos com a doxiciclina, tratamento jà estabelecido. A DPE foi induzida passando-se fio de nÃilon 3.0 em torno do segundo molar superior esquerdo de ratos Wistar fÃmeas, permanecendo durante 11d. AD (0,25mg/kg, s.c.) foi administrado 30 minutos antes e diariamente (tratamento preventivo) ou AD (0,25mg/kg, s.c.), DX (5 ou 10 mg/kg) ou salina (0,2ml) foram injetados a partir do 5 dia da induÃÃo da DPE (tratamento curativo). Os parÃmetros avaliados foram: Ãndice de perda Ãssea (IPO), anÃlise histopatolÃgica e microbiolÃgica, imunohistoquÃmica, migraÃÃo de neutrÃfilos, mieloperoxidase (MPO), leucogramas realizados antes e apÃs a cirurgia (6h e 1, 7 e 11 dias) e variaÃÃo da massa corpÃrea. No IPO, AD reduziu consideravelmente a reabsorÃÃo Ãssea tanto de forma preventiva como curativa sendo comparÃvel à doxiciclina. Na anÃlise histopatolÃgica, o periodonto dos animais tratados com AD mostrou preservaÃÃo do osso alveolar, cemento e das fibras colÃgenas, alÃm de reduÃÃo do infiltrado neutrofÃlico gengival de 6h. Esta inibiÃÃo da migraÃÃo neutrofÃlica foi confirmada atravÃs da MPO e em modelo de peritonite abdominal e o leucograma mostrou uma reduÃÃo da neutrofilia. A imunohistoquÃmica mostrou que o AD diminuiu a marcaÃÃo para TNF em 6h e 11d. No microbiolÃgico, AD inibiu qualitativamente o crescimento de bactÃrias caracterÃsticas da DP, tais como pigmentados e Fusobacterium nucleatum. AD promoveu um aumento na massa corpÃrea em relaÃÃo ao grupo salina. Esses resultados mostram que o AD possui importante atividade na DPE, sugerindo a relevÃncia de testes clÃnicos dos bisfosfonatos no tratamento da doenÃa periodontalPeriodontitis, the major cause of teeth loss in adults, is an inflammatory disease in which occurs alveolar bone resorption and collagen fibers destruction. Bacteria and host factors are necessary to the development of this pathology. Bisphosphonates are a new class of drugs that inhibit bone resorbtion by causing morphological alterations or death of osteoclasts. The objetive of this study is to investigate the effect of the bisphosphonate Dissodic Alendronate (DA) in periodontitis, comparing it with the doxicicline (DX), treatment currently used. Periodontitis was induced by a nylon thread ligature surgically placed around the cervix of the second left maxillary molars of female Wistar rats. Animals were treated with DA (0.25 mg/kg, s.c.) 30 minutes before periodontits induction and daily until sacrifice on 11th day (preventive group). Additionally, saline, DA or DX (5 or 10 mg/kg) were injected s.c. from 5th day and daily up to the 11th day of periodontal disease (curative treatment). The parameters analysed were alveolar bone loss (ABL), histopathologic and microbiological analysis, immunohistochemistry, myeloperoxidase (MPO), neutrophil migration, leukogram measured before and after challenge (6h and 1, 7 and 11 days) and body mass variation. AD, as curative or preventive treatment, reduced this alveolar bone loss similar DX. Histopatologically, the periodontium of animals treated with DA showed preservation of alveolar bone, cementum and collagen fibers of periodontal ligament, and reduced neutrophilic and mononuclear cell infiltrate. This effect on neutrophilic infiltrate was confirmed by MPO and in model of peritonitis induced by carrageenan. In imunohistochemistry, there was marked reduction of immunostaining for TNF in the group treated with DA compared to the saline group. In microbiologic analysis, DA inhibited the growth of bacteria involved in periodontitis. DA increased body mass compared to saline group. These results support clinical testing of bisphosphonates in the treatment of periodontal diseas