Study of the effect of the chronic inhibition of nitric oxide in the reproduction of male rats

O Ãxido nÃtrico (NO), derivado da L-arginina pela Ãxido nÃtrico sintetase (NOS), a qual existe em vÃrias isoformas, Ã considerado um importante mensageiro molecular em vÃrios ÃrgÃos incluindo o trato genital masculino. Este estudo analisou o possÃvel efeito do L-NAME (NG-nitro-L-arginina metil Ãster), um inibidor nÃo seletivo de NOS sobre a descida testicular, emissÃo seminal induzida por colinÃrgico, funÃÃo testicular, comportamento sexual e fertilidade em ratos Wistar machos. O tratamento de ratos machos de 20 dias de idade com L-NAME na dose de 20mg/kg/dia por 10 dias consecutivos promoveu um significativo retardo na descida testicular comparado ao controle que recebeu salina. Este efeito do L-NAME foi bloqueado em animais prÃ-tratados com L-arginina (600mg/kg, s.c.), um substrato para a biossÃntese de NO, sugerindo que o NO exerce um papel modulador na descida testicular. Em ratos machos adultos, a pilocarpina (0,75 e 3,0 mg/kg, i.p.), droga colinÃrgica, induziu a emissÃo seminal de maneira dose-dependente. A emissÃo seminal em resposta a pilocarpina ( 3,0 mg/kg) foi diminuÃda em animais atropinizados sugerindo um efeito colinÃrgico. L-NAME tembÃm inibiu a emissÃo seminal induzida por pilocarpina e este efeito foi revertido por L-arginina (600mg/kg, s.c.) ou pela administraÃÃo conjunta de nitroprussiato de sÃdio (0,5mg/kg, s.c.). AlÃm disto, a anÃlise urinÃria de nitrato/nitrito demonstrou marcada alteraÃÃo em concordÃncia com o tratamento. Estes resultados sugerem que o NO participa na neurotransmissÃo inibitÃria responsÃvel pela emissÃo seminal em ratos estimulados com pilocarpina. Em experimentos realizados para verificar os efeitos da inibiÃÃo crÃnica de NOS sobre o comportamento copulatÃrio, o tratamento de ratos com L-NAME (40mg/kg/dia) durante um perÃodo de um ciclo completo de espermatogÃnese uma influÃncia inibitÃria sobre o comportamento sexual foi evidenciada por um aumento na latÃncia da primeira monta e intromissÃo e marcada inibiÃÃo da frequÃncia de intromissÃo e ejulaÃÃo. A inibiÃÃo crÃnica de NOS tambÃm demonstrou alteraÃÃo na funÃÃo testicular refletida pela diminuiÃÃo nos nÃveis sÃricos de testosterona, contagem de espermatozÃides e anormalidades espermÃticas. O nÃmero de fÃmeas grÃvidas, de machos que receberam tratamento crÃnico com L-NAME, foi reduzido resultando em 75% de inibiÃÃo da fertilidade. O efeito de L-NAME sobre a fertilidade masculina pode dever-se a inibiÃÃo da NOS perifÃrica e central promovendo inibiÃÃo da secreÃÃo local de androgÃnios e/ou gonadotrofinas. Os resultados mostram evidÃncias que o NO regula de maneira importante o processo reprodutivo masculino tais como descida testicular, comportamento sexual e fertilidadeNitric Oxide (NO) derived from L-arginine by the nitric oxide synthase (NOS) which is expressed by various isoforms, is considered to be na important messenger molecule in several organ systems including the male genital tract. This study analysed the possible effects of L-NAME (NG-nitro-L-arginine methyl ester), a nonselective NOS inhibitor on testicilar descent; cholinergic stimulation-induced seminal emission; testicular function; sexual behaviour; and on fertility of male Wistar rats. Treatment of 20 days old male rats with L-NAME at 20mg/kg/day for 10 consecutive days caused a significant delay in the testes descent compared to controls that receives only normal saline. This effect of L-NAME was fully reversed in animals pretreated with L-arginine (600mg/kg, s.c.), a substrate for NO biosynthesis, suggesting stimulant drug pilocarpine (0.75 â 3.0 mg/kg, i.p.) induced a dose-related seminal emission. The seminal emission response to 3.0mg/kg of pilocarpine was greatly diminished in atropinized animals, suggesting a cholinomimetic effect. L-NAME, also inhibited the pilocarpine-induced seminal emission which could be reversed by L-arginine (600mg/kg, s.c.). Further, urine analysis for nitrate/nitrite metabolites showed marked alterations in accordance to the drug treatments. These results suggest that NO mediates the inhibitory neurotransmission responsible for seminal emission in pilocarpine stimulated rats. In experiments carried out to verify the effects of chonic NOS inhibition on copulatory behavior, treatment of rats with L-NAME (40mg/kg/day) for a period of one complete spermatogenic cycle caused an inhibitory influence on sexual behavior as evidenced by a increase in the first mount and intromission latencies and marked inhibitions of the intromission and ejaculation frequencies. Chronic NOS inhibition further evidenced impaired testicular function, reflected by decreases in serum levels of testosterone, epididymal sperm counts and sperm abnormalities. The number of females impregnated with males that received chronic L-NAME treatment was highly reduced, resulting in 75% inhibition of fertility. The adverse influence of L-NAME on male infertility could be due to NOS inhibition at both peripheral and central sites causing inhibition of local androgen and/or gonadotropin secretions. These results provide evidence that NO importantly regulates male reproductive processes such as testicular descent, sexual behavior and fertilit