Experimental inoculation of Salmonella Enteritidis in turkeys and infection control with the use of lactulose in the diet

Foram desenvolvidos três experimentos com os objetivos de elucidar aspectos que envolvem a patogênese, clínica, alterações anatomopatológicas e imunológicas, bem como o controle com uso da lactulose e nas variáveis de desempenho de perus inoculados experimentalmente com Salmonella Enteritidis. Experimento 1 foi constituido de três tratamentos, sendo um grupo controle, um grupo inoculado com 6,0x102 UFC/mL e o terceiro inoculado com 7,0x105 UFC/mL de Salmonella Enteritidis. Com 1, 3, 6, 12, 18 e 24h e com três, quatro, 38 e 49 dias pós-inoculação, duas aves por tratamento foram sacrificadas e coletados sacos vitelínicos, baços, bursas de Fabricius e cecos, para pesquisa da Salmonella, contagem de linfócitos e imunoistoquímica. O patógeno foi identificado nos órgãos estudados em ambos os testes utilizados e o número de linfócitos foi reduzido. Em perus observou-se que a dose influencia a penetração, disseminação, eliminação e persistência do patógeno nos perus. No experimento 2 foram utilizados 160 perus, distribuidos em quatro tratamentos que receberam 6,0x102UFC/mL, 7,0x105 UFC/mL, 8,0x109 UFC/mL de Salmonella Enteritidis e um grupo controle. Com 1, 3, 6, 12, 18 e 24h e aos três, quatro, 38 e 49 dias foram coletados sangue, fígado, baço e bursa de Fabricius de duas aves por tratamento para análises eletroforéticas, bacteriológicas e histopatológicas e contagem de linfócitos, respectivamente. Houve diferença nos dados de proteínas séricas totais, assim como no isolamento bacteriano e nas alterações teciduais a partir de 6h até quatro dias. As depleções de linfócitos foram registradas a partir de 3h pós-inoculação. A mortalidade observada foi alta em todos os grupos na primeira semana, sendo que as principais alterações clínicas, histopatológicas e mortalidade foram mais evidentes no grupo que recebeu a maior dose. Verificou-se que os valores de proteínas séricas, lesões histopatológicas no fígado, bem como depleção de linfócitos ocorre principalmente nos primeiros dias pós-infecção. O Experimento 3 constituiu-se de 280 perus distribuídos em quatro tratamentos: placebo; controle da lactulose; inoculados com 7,0x105 UFC/mL e inoculados com 7,0x105 UFC/mL de Salmonella Enteritidis e tratados com a lactulose. Aos sete, 21, 42 e 60 dias foram realizadas análises de desempenho e uma ave de cada parcela foi sacrificada para coleta de duodenos e jejunos para análises histomorfométricas, inglúvios e cecos para enumerações de Enterobacteriaceae, Lactobacillus e Salmonella, aferições de pH e biometria de intestinos delgados e grossos. Ainda, foram coletados o fígado, baço, bursa de Fabricius e trato gastrintestinal, para análises bacteriológicas, histopatológicas, contagem de linfócitos, e exames biométricos. Observou-se, menor ganho de peso no grupo que recebeu somente o patógeno e maior no que recebeu somente a lactulose. Verificaram-se maiores relações vilos: criptas nos duodenos e jejunos dos grupos placebo e da lactulose aos sete e aos 21 dias. Maiores quantidades de unidades formadoras de colônias de Enterobacteriaceae e Lactobacillus foram observadas nos grupos que receberam a lactulose. Salmonella Enteritidis determina alterações histopatológicas e depleções linfocitárias e mortalidade. A lactulose aumenta bactérias benéficas, reduz a colonização de Salmonella, promove maior desenvolvimento intestinal e melhor desempenho, minimiza alterações teciduais e linfocitárias, reduzindo a mortalidade e o estado de portador.Three experiments were performed aiming to elucidate aspects concerning the pathogenesis, clinical, pathological and immunological changes in turkeys inoculated with Salmonella Enteritidis, as well as the control and performace variables, with the use of lactulose. Experiment 1 consisted of three treatments and a control group. A second group inoculated with 6.0x102 CFU/mL and a third one inoculated with 7.0x105 CFU/mL of Salmonella Enteritidis. Within 1, 3, 6, 12, 18 and 24, and three, four, 38 and 49 days post-inoculation, two birds per treatment were sacrificed and vitelline sacs, spleen, bursa of Fabricius and ceca were coleted for Salmonella research, lymphocytes levels, and immunohistochemistry. The pathogen was isolated in organs studied in both tests and the lymphocytes levels decreased. Was observed that the dose influences the penetration, dissemination, and persistence of the pathogen elimination in turkeys. In Experiment 2, 160 turkeys were distributed into four treatments within 6.0x102CFU/mL, 7.0x105 CFU/mL, 8.0x109 CFU/mL of Salmonella Enteritidis and a control group. With 1, 3, 6, 12, 18 and 24 and three, four, 38 and 49 days were sampled blood, liver, spleen and bursa of Fabricius of two birds per treatment for electrophoretic, bacteriological and histopathological analysis, and also lymphocyte levels. There were differences in total serum protein data, as well as in bacterial isolation and tissue changes from 6 hours to 4 days before. The decrease of lymphocytes levels were registered from 3 hours post-inoculation. High mortality levels were observed in all groups in the first week, of which the main clinical and histopathological changes, as well the mortality levels were more evident in the group that received the highest dose. Was observed that serum proteins values, liver histopathological lesions, and decrease of lymphocytes levels occurs primarily in the first days post-infection. Experiment 3 consisted of 280 turkeys distributed in four treatments: placebo, control of lactulose; inoculated with 7.0x105 UFC/mL of Salmonella Enteritidis and inoculated with 7.0x105 UFC/mL of Salmonella Enteritidis and treated with lactulose. At seven, 21, 42 and 60 days were performed analisis of accomplishment. One bird of each quota was sacrificed and collected duodenum and jejunum from each for histomorphometric analysis, and ceca and inglúvios for enumerations of Enterobacteriaceae, Lactobacillus, Salmonella, pH measurements and biometric examination of intestines. Still, were collected liver, spleen, bursa of Fabricius and the gastrointestinal tract for bacteriological, histopathological, lymphocyte levels, and biometric examination. Were observed a lower weight gain in the group that received only the pathogen and increased only in patients that receiving lactulose. Were observed a higher correlation villous: crypt in the duodenum and jejunum of lactulose and placebo groups at seven and 21 days. Higher levels of UFC of Lactobacillus and Enterobacteriaceae were observed in the groups that receivied lactulose. Salmonella Enteritidis infections determine histopatological changes, decrease of lymphocyte levels and mortality. Lactulose increases beneficial bacteria, reduces the colonization of Salmonella, Promotes intestinal development and improved the animal performance, minimizes lymphocyte and tissue changes, reducing mortality and carrier state