Obtaining and chacterization of santadardized dry extract of Vernonanthura ferruginea (LESS.) H. Rob., Asteraceae

Vernonanthura ferruginea (Less.) H. Rob. (Asteraceae), planta típica do cerrado brasileiro, conhecida popularmente como assa-peixe, demonstrou atividade analgésica, antiedematogênica, antioxidante e antiulcerogênica em estudos científicos. Porém, na literatura consultada não existem trabalhos relacionados à produção de extratos secos desta espécie vegetal. A obtenção de extratos secos padronizados de V. ferruginea, por meio da técnica de spray drying iniciou-se pela obtenção e caracterização do material de partida (pó das folhas da planta) e a partir deste, obteve-se o extrato hidroalcoólico pelo método de percolação usando como líquido extrator etanol a 95% (v/v). Os experimentos de secagem foram conduzidos seguindo um planejamento fatorial do tipo 23 + 2 a fim de investigar as influências de alguns parâmetros envolvidos no processo, e. g. fluxo de alimentação de extrato, temperatura de entrada do ar de secagem e proporção de adjuvante de secagem nas propriedades dos extratos secos obtidos, tais como rendimento do processo, umidade residual, atividade de água, teor de triterpenos totais e teor de lupeol. O lupeol, triterpeno relacionado à diversas atividades farmacológicas (antiinflamatória, antitumoral, antiulcerogênica, etc), foi isolado pela primeira vez nesta espécie e selecionado como marcador químico de todas as etapas do processo. Para tanto, foi validado um método analítico por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) seguindo os parâmetros e critérios de aceitação propostos pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), o qual provou ser seletivo, linear, sensível, preciso, exato e robusto. Na caracterização do pó das folhas, foi realizada prospecção fitoquímica preliminar onde foi constatada a presença de taninos, flavonóides, triterpenos, saponinas, resinas e mucilagens. Foram verificados teores de voláteis, triterpenos totais e lupeol que apresentaram valores de 8,25 ± 0,57%, 2,49 ± 0,16% e 0,17 ± 0,01%, respectivamente, além de tamanho médio de partículas de 398,97 ± 6,91 μm. O extrato hidroalcoólico apresentou densidade 0,8364 ± 0,0015 g/mL, resíduo seco de 6,70 ± 0,19%, pH 5,81 ± 0,05, teor alcoólico de 87,08 ± 0,80% e viscosidade de 4,93 ± 0,0416 mPas. Ainda foram obtidos teores de triterpenos totais e lupeol de 22,57 ± 0,94% e 4,31 ± 0,01%, respectivamente. Os rendimentos de secagem variaram de 10,47 a 30,82%, sendo que em todos os produtos secos, foram observados teores de voláteis e atividade de água abaixo de 5% e 0,5, respectivamente. Análises de Variância (ANOVA) demonstraram que todos os fatores e algumas de suas interações afetaram significativamente o teor de triterpenos totais e o teor de lupeol no pó, sendo que a condição selecionada para ser empregada na obtenção de extratos secos padronizados de assa-peixe com propriedades físico-químicas adequadas foi aquela realizada com maior proporção de dióxido de silício coloidal (20%), menor vazão de extrato de alimentação (4mL/min) e menor temperatura do ar de secagem (80°C), na qual obteve-se teores de triterpenos totais e lupeol de 7,65 ± 0,27% e 2,47 ± 0,04%, respectivamente. O extrato seco obtido nestas condições apresentou alta proporção de partículas esféricas e a sua atividade antiulcerogênica no modelo de úlceras induzidas por indometacina foi comprovada. A comparação do perfil cromatográf ico (CCD) do pó, do extrato hidroalcoólico e do extrato seco demonstrou que a extração hidroalcoólica foi seletiva para a extração de lupeol em relação a outros terpenos majoritários e o processo de secagem não ocasionou alterações no perfil químico do extrato em relação a estas substâncias. Assim, a técnica de spray drying pode ser uma alternativa atrativa e promissora para o desenvolvimento de fitoterápicos de V. ferruginea.Vernonanthura ferruginea (Less.) H. Rob. (Asteraceae), a typical plant of the Brazilian savannah, popularly known as assa-peixe, presented analgesic, antiedematogenic, antioxidant and antiulcer activities in scientific studies. But in literature there are no works related to the production of dried extracts of this plant species. In this work, standardized spray-dried extracts of V. ferruginea were obtained. The work started with the obtainment and characterization powder of the leaves of the V. ferruginea. A hydroalcoholic extract was obtained by percolation using as solvent ethanol 95 % (v/v). The drying experiments followed a 23 + 2 factorial design. The influence of several in-process parameters e. g. extract feed rate, drying air inlet temperature and drying adjuvant ratio, on the dried extracts properties were investigated. The properties investigated were process yield, residual moisture, water activity, total triterpenes content and lupeol content. The lupeol, triterpene related to several pharmacological activities (anti-inflammatory, anticancer, antiulcer, etc), was first time isolated in this species and was used as chemical marker in High Performance Liquid Chromatography (HPLC) quantification assays in all steps of this work. In this way an analytical methodology was validated following Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA Brazilian National Health Surveillance Agency) guidelines. This methodology proved to be selective, linear, sensible, precise, accurate and robust. On the herbal raw material characterization, preliminary phytochemical screening was performed, which confirmed the presence of tannins, flavonoids, triterpenes, saponins, resins and mucilage. Was also observed a mean powder size of 398.97 ± 6.91 μm, as well as moisture, total triterpenes and lupeol contents of 8.25 ± 0.57%, 2.49 ± 0.16% and 0.17 ± 0.01%, respectively. The concentrated hydroalcoholic extract presented density of 0.8364 ± 0.0015 g/mL, solids content of 6.70 ± 0.19%, pH 5.81 ± 0.05, alcoholic content of 87.08 ± 0.80% and a viscosity of 4.93 ± 0.0416 mPas. The levels of total triterpenes and lupeol contents were 22.57 ± 0.94 and 4.31 ± 0.01%, respectively. Results showed drying yields ranging from 10.47 to 30.82%. Also, all dried products showed moisture contents and water activities below 5% and 0.5, respectively. Analysis of variance (ANOVAs) proved that all factors and some of their interactions significantly affected the levels of total triterpenes and lupeol contents. Moreover, the selected condition for obtaining dry extracts of V. ferruginea with adequate physicochemical properties is the one performed with the higher colloidal silicon dioxide ratio (20%), the lower extract feed rate (4mL/min) and the lower drying air inlet temperature (80°C), in which it was obtained levels of total triterpenes and lupeol contents of 7.65 ± 0.27% and 2.47 ± 0.04%, respectively. The dry extract obtained in this condition show high content of spherical particles and its antiulcer activitie in model of ulcer induced by indomethacin was proved. Comparison of powder, hydroalcoholic and dry extract chromatographic (TLC) show that the hydroalcoholic extraction was selective for the extraction of lupeol against other major terpenes and the drying process did not cause changes in the chemical profile of the extract with respect to these substances. Thus, the spray drying can be an attractive e and promising alternative for the development of V. ferruginea phytomedicines