Blood parasitism profile of Babesia, Ehrlichia and Hepatozoon determined by molecular analysis in syntomatic dogs in the metropolitan area of Goiânia, Goiás

Nos gêneros Babesia, Ehrlichia e Hepatozoon são posicionadas as espécies de parasitos responsáveis pela babesiose, ehrlichiose e hepatozoonose respectivamente. Estes microrganismos têm em comum o fato de serem transmitidos por carrapatos vetores e causarem nos cães infectados sinais gerais como febre, anemia e icterícia acompanhados de infecções intracelulares. No estado de Goiás não haviam trabalhos com abordagem filogenética relativos a estes hemoparasitos. O objetivo geral do presente trabalho foi realizar análise molecular de isolados de Babesia, Ehrlichia e Hepatozoon obtidos de cães sintomáticos na cidade de Goiânia, Estado de Goiás, verificando assim qual a espécie e subespécie envolvida nas infecções. Para isto, foi realizado extração de DNA das amostras, seguido da realização de PCR com oligonucleotídeos genéricos. Após a PCR obteve-se fragmentos da região do 18S rRNA para as amostras de Babesia e Hepatozoon e do 16S rRNA para a pesquisa de espécies do gênero Ehrlichia. Os produtos de PCR obtidos foram purificados e utilizados para o sequenciamento. Foram seqüenciadas 35 amostras de Babesia spp. e destas 17 foram utilizadas para os estudos filogenéticos. Duas amostras de Hepatozoon spp. foram seqüenciadas e 17 amostras de Ehrlichia spp sendo que apenas cinco foram utilizadas para as análises. As análises de identidade realizadas com as amostras seqüenciadas permitiram a identificação de B. canis vogeli, Hepatozoon canis e Ehrlichia canis. Quando confrontadas com as espécies e subespécies de referência de outras regiões do Brasil e do mundo apresentaram estreita similaridade molecular, o que demonstra a baixa variabilidade entre as diferentes amostras de diferentes regiões geográficas. Pela análise feita utilizando-se o programa MEGA4 e subsequente construção de árvores filogenéticas as amostras deste estudo formaram grupos próprios sempre em associação com as amostras de referência para as respectivas espécies. Dessa forma foi possível concluir que as amostras de B. c. vogeli, H. canis e E. canis provenientes de cães da cidade de Goiânia-GO apresentam estreita similaridade com isolados de outras regiões do mundoIn the genera Babesia, Ehrlichia and are positioned Hepatozoon species of parasites responsible for babesiosis, ehrlichiosis and hepatozoonosis respectively. These organisms have in common the fact that they are transmitted by tick vectors in dogs infected and cause general symptoms such as fever, anemia and jaundice accompanied by intracellular infections. In the state of Goias had not work with phylogenetic approach for these blood parasites. The overall objective of this study was molecular analysis of isolates of Babesia, Hepatozoon and Ehrlichia obtained from symptomatic dogs in Goiânia, Goiás State, thus confirming that the species and subspecies involved in infections. For this, DNA extraction was carried out of samples, followed by carrying out PCR with generic primers. After the PCR was obtained fragments of the 18S rRNA region for samples of Babesia and Hepatozoon and 16S rRNA for the detection of species of the genus Ehrlichia. PCR products obtained were purified and used for sequencing. We sequenced 35 samples of Babesia spp. and of these 17 were used for phylogenetic studies. Two samples of Hepatozoon spp. 17 samples were sequenced and Ehrlichia spp which only five were used for analysis. Analyses performed with the identity of sequenced samples allowed the identification of B. vogeli canis, Hepatozoon canis and Ehrlichia canis. When confronted with the species and subspecies of reference from other regions of Brazil and the world showed close molecular similarity, which demonstrates the low variability between different samples from different geographic regions. For the analysis using the program MEGA4 and subsequent construction of a phylogenetic tree samples in this study formed their own groups always association with the reference samples for the respective species. Thus it was concluded that samples of B. c. vogeli H. canis and E. canis from dogs in the city of Goiania GO show close similarity with isolates from other regions of the worl