Cytogenetic and molecular characterization of three acesses of Lippia alba (Mill.) N.E. Br. (Verbenaceae)

Em Lippa alba (Mill.) N.E.Br. (Verbenaceae), popularmente conhecida como cidreira, são observados quimiotipos, denominados La1- citral, La2- carvona e La3- linalol que apresentam variações morfológicas e diferentes atividades farmacológicas. Estudos morfológicos, anatômicos e fitoquímicos desses quimiotipos têm demonstrado que, mesmo sob as mesmas condições ambientais essas diferenças são observadas. A espécie apresenta importância econômica e medicinal e tais variações dificultam a correta identificação desses materiais sendo necessária a utilização de técnicas que auxiliem na identificação precisa dos mesmos. O presente estudo teve por objetivos verificar por meio da citogenética e de marcadores RAPD se as variações observadas entre esses quimiotipos ocorrem devido a diferenças genéticas entre eles e auxiliar na correta identificação e classificação dos mesmos. Três acessos correspondentes aos quimiotipos La1, La2 e La3 foram analisados. Para o estudo dos núcleos interfásicos e do cariótipo, raízes foram pré-tratadas com antimitóticos e as lâminas, preparadas por meio da técnica de dissociação celular. Para a análise meiótica, botões florais foram coletados, fixados e as lâminas preparadas por meio da técnica de secagem ao ar. A viabilidade dos grãos de pólen foi avaliada por meio da coloração de Alexander. Na análise de RAPD, realizada segundo Williams et al.(1990), testaram-se 47 primers. Foram calculados os coeficientes de similaridade de Nei & Li (1979) para a construção da matriz de distâncias e do dendrograma. La1 e La2 apresentaram núcleos interfásicos arreticulados, 2n=30 (6M + 9SM) e 2n=60 (15M+ 14SM + 1AC) e um comprimento total do genoma de 43m e 83,67m, respectivamente. La3- linalol apresentou-se mixoplóide com números cromossômicos variando de 2n=12 a 60 e um cromossomo com características de cromossomo B em algumas células. Seus núcleos interfásicos são do tipo semi-reticulado. O percentual de anormalidades meióticas foi de 16,49%; 91,9% e 83,6% e a viabilidade do grão de pólen, de 82,35%, 52,51% e 34,75% para La1, La2 e La3, respectivamente. Dos 47 primers testados, 70,2% foram selecionados. Foram amplificadas 208 bandas, 33 das quais foram monomórficas. Verificou-se que se formaram dois grupos principais, correspondendo a La1 e La2, e que indivíduos La3 se agruparam com os dois quimiotipos. La3 apresentou maior variação dentro (0,29) do que os demais (0,02 e 0,03 para La1 e La2, respectivamente). As variações observadas entre esses quimiotipos ocorrem devido à existência de diferenças genéticas entre eles. Nossos resultados permitem sugerir que La2- carvona é um autopoliplóide de La1- citral. La3- linalol é possivelmente um híbrido resultante do cruzamento entre La1 e La2. É possível que as mudanças pelas quais esses quimiotipos estão passando constituam mecanismos que podem levar à especiação dos mesmos, sendo necessário reunir a esses resultados, dados morfológicos, bioquímicos e ecológicos para uma reformulação da categoria taxonômica dos mesmos