Structural analysis of oocytes, fertilization and embryogenesis and the effects of cryopreservation on sperm motility,embryogenesis and larval growth in tiete tetra Brycon insignis (Characiformes)

A piabanha Brycon insignis é uma espécie nativa e endêmica da bacia do rio Paraíba do Sul. Ao longo dos anos esta bacia vem sofrendo com represamentos, desmatamento da mata ciliar e poluição fazendo com que muitas espécies, incluindo a B. insignis estejam ameaçadas de extinção. A criopreservação de sêmen pode ser uma ferramenta útil na fertilização artificial e programas de recuperação de estoques ameaçados. Contudo, os efeitos do uso de sêmen criopreservado sobre o desenvolvimento embrionário, sobrevivência e desenvolvimento da progênie ainda não estão claros. Neste estudo, procurou-se aprofundar o conhecimento sobre os eventos pós-fertilização e embriogênese nesta espécie, através de análise ao microscópio eletrônico e estereomicroscópio (artigo 1), bem como avaliar o efeito da criopreservação do sêmen na qualidade espermática, embriogênese e desenvolvimento da progênie até 112 dias (artigo 2). O sêmen foi criopreservado em meio contendo metil glicol e BTS® (Minitube do Brasil), em palhetas de 0,5 mL, no congelador de vapor de nitrogênio dry-shipper e descongelado em banho maria a 60°C. Sete estágios de desenvolvimento embrionário foram observados: zigoto, clivagem, blástula, gástrula, segmentação, larval e eclosão. O sêmen criopreservado apresentou menores taxas de motilidade e de vigor espermático (53%, escore 3) em relação ao sêmen fresco (100% e escore 5). Apesar da diminuição na qualidade espermática, não houve diferença quanto ao desenvolvimento embrionário entre as progênies originadas do sêmen criopreservado em relação ao fresco (24% dos embriões estavam em estagio de gastrulação 10 h após a fertilização), nem quanto à taxa de eclosão (24%). O percentual de larvas normais (88-97%) foi semelhante entre as progênies. As larvas se desenvolveram de forma semelhante nas duas progênies, passando de 1,3 cm e 0,03 g aos 7 dias após a eclosão, para 13,8 cm e 45,9 g aos 112 dias após a eclosão. Os resultados obtidos são relevantes por aprofundar o conhecimento sobre os eventos da fertilização e embriogênese e por demonstrar que o desenvolvimento embrionário, larval e crescimento da progênie até 112 dias desta espécie não sofreu interferência do uso do sêmen criopreservado. Assim sêmen de piabanha criopreservado de acordo com o método descrito pode ser utilizado na rotina das pisciculturas para facilitar a reprodução artificial, formar um banco de germoplasma e preservar a variabilidade genética dessa espécie