Aspectos moleculares, bioquímicos e anatômicos da tolerância à dessecação em sementes de Peltophorum dubium (Spreng.) Taub

Com o intuito de contornar o entrave nas pesquisas com sementes recalcitrantes, causado pela rápida perda da viabilidade destas, duas técnicas têm sido utilizadas, como modelos nos estudos da sensibilidade à dessecação. São elas o uso de sementes ortodoxas germinadas e reindução da tolerância à dessecação. Neste trabalho, eventos relacionados à perda da tolerância à dessecação, durante a germinação de sementes de Peltophorum dubium (Sprengel) Taubert, foram avaliados por meio da expressão de proteínas resistentes ao calor (PRC), enzima removedora de radicais livres catalase (CAT), quantificação de açúcares e dados de expressão gênica. Possíveis alterações na quantificação de açúcares e na expressão gênica, também, foram mensuradas quando a tolerância à dessecação foi reinduzida. Os tempos de embebição utilizados foram 0h, 39h, 57h e 72h, pré-determinados, em virtude dos resultados obtidos nos ensaios de caracterização da perda da tolerância à dessecação (TD). Já na tentativa de reinduzir a tolerância à dessecação, foram testadas diferentes combinações de protocolos, sendo considerado como mais adequada a incubação das sementes germinadas em ABA 5 μM, a 4°C, por 3 dias. Foram investigadas, também, alterações anatômicas em células do eixo embrionário de sementes embebidas e, posteriormente, submetidas à secagem, por meio da microscopia de luz. Danos por secagem foram averiguados em eixos embrionários de sementes embebidas por 72 horas e amostradas para cada um dos seguintes tratamentos: secagem a 60%, 30% e 10% de umidade. A alteração no padrão de proteínas resistentes ao calor corrobora com os resultados de perda da tolerância à dessecação, já que houve redução na expressão destas durante a embebição. Pelos resultados referentes à enzima CAT, observa-se que a intensidade da banda visualizada para o controle foi, consideravelmente, menor em relação aos demais tempos de embebição, mostrando-se constante posteriormente. Também, durante o processo germinativo, foi observado decréscimo nos valores dos açúcares rafinose, estaquiose e trealose, sugerindo uma correlação destes com a tolerância à dessecação. Contudo, nesse caso, o tratamento de reindução da tolerância à dessecação não foi capaz de alterar estes valores. Os dois genes analisados nesta pesquisa, sendo eles MEDTR4G093060_1 e MEDTR3G072000_1 (descritos para proteínas de choque térmico e para enzima removedora de radicais livres superóxido dismutase, respectivamente) não evidenciaram alterações, durante o processo germinativo, porém houve incremento significativo na expressão de ambos após o tratamento para reindução da tolerância à dessecação. Danos em membranas celulares durante a secagem foram evidentes.Tese apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-graduação em Engenharia Florestal, área de concentração Ciências Florestais, para obtenção do título de Doutor