Analysis of genes associated with expression promoter regions of tissue-specific type in banana (Musa spp.)

A bananeira é uma espécie pertencente à família Musaceae típica de regiões tropicais e subtropicais, que apresenta grande importância econômica e social no mundo, uma vez que constitui fonte de renda e alimento para milhões de pessoas. O cultivo da bananeira é afetado por diversos problemas causados por fungos, bactérias, vírus, nematóides e insetos, além de estresses abióticos. Uma das estratégias para a solução desses problemas é a geração de novas variedades com resistência a doenças e pragas e mais tolerantes às adversidades climáticas. Isto se dá mediante o desenvolvimento de programas de melhoramento genético, baseados em métodos convencionais ou biotecnológicos, que possibilitam a obtenção de genótipos superiores. Neste contexto, o emprego de técnicas de engenharia genética como a caracterização de promotores tecido-específicos favorece a aplicação de técnicas mais refinadas de manipulação do genoma como a cisgenia, a qual visa o manejo dos genes da própria espécie em questão. No presente trabalho, foram utilizadas sequências gênicas com potencial para expressão tecido-específica previamente selecionadas em um virtual screening realizado no banco de dados DATAmusa. A partir destas sequências foram desenhados primers que posteriormente foram submetidos a análise qualitativa (RT-PCR) e quantitativa (qPCR) em sete tecidos diferentes (Polpa verde, Polpa madura, Casca verde, Casca madura, Folha, Flor e Raiz) de duas cultivares de bananeira (Prata Anã e Grande Naine), pertencentes a grupos genéticos distintos (AAB e AAA, respectivamente). Dos 23 genes previamente selecionados, foi possível identificar após análise qualitativa, seis genes que apresentaram expressão tecido-específica. Estes foram avaliados quantitativamente (qPCR) e ao final foi possível identificar um gene tecido-específico para raiz de Prata Anã. Desta forma, identificando a seqüência gênica deduz-se a presença do promotor tecido-específico