Somatic embryogenesis and protoplast isolation of Caryocar brasiliense CAMB.

O pequizeiro é uma das espécies frutíferas nativas do Cerrado de maior potencial econômico e ecológico e de grande importância social. Nas últimas décadas, grandes extensões de terra no Cerrado têm sido incorporadas ao sistema agrícola. Este fato, aliado à baixa taxa de regeneração natural, tem levado ao declínio de populações naturais da espécie. Em vista disso, estudos de técnicas de propagação para a produção de mudas visando ao plantio racional da espécie e recuperação de áreas degradadas tornam-se necessários. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de estudar o cultivo in vitro do pequizeiro por calogênese, organogênese, embriogênese somática e isolamento de protoplastos. Foram testadas, para indução de embriões somáticos e calos embriogênicos, combinações de concentrações de 2,4-D x sacarose e 2,4-D x 2-iP. Para o desenvolvimento de embriões foi testado o ABA. Quanto ao isolamento de protoplastos, foram testadas duas soluções enzimáticas, tempo de incubação, concentrações de manitol e sistema de incubação (estacionário e agitação orbital). Para o cultivo in vitro foram testadas combinações de concentrações de BAP x ANA e de cinetina x picloran. Foi testado também o cultivo em meio líquido e sólido e na presença e ausência de luz. De acordo com os resultados, obtiveram-se embriões e calos embriogênicos aos 45 dias de cultivo e de calos embriogênicos em subcultivo aos 45 dias com o uso de 60 g L-1 de sacarose em meio MS. Obtiveram-se 18,32 x 105 ±1,18 protoplastos por grama de massa fresca de tecido foliar obtido in vitro, com diâmetro médio de 25,19 ±4,75 μm. Utilizou-se solução enzimática composta por 1% (p/v) Cellulase "Onozuca R- 10" (Yakult Honsha) + 0,2% (p/v) de "Macerozyme R10" (Yakult Honsha) + 0,1% (p/v) de Driselase (Sigma London Chemical Co Ltda) + 5 mM de MES, em meio CPW a 0,6M de manitol em incubação por 10 horas em sistema estacionário, com 96,7% de protoplastos viáveis. No cultivo in vitro, obtiveramse maiores médias para número de folhas (3,74), tamanho médio das três maiores brotações (9,45 mm), massa fresca (1,23 g) e massa seca (0,15 g) utilizando cultivo em meio líquido. Folhas obtidas do cultivo em meio sólido apresentaram maior espessura. Brotações na ausência de luz apresentaram maior comprimento médio. Maior número e tamanho de brotações (13,3 e 22,94mm) foram obtidos com 0/1 e 0/0,5 de ANA/BAP, respectivamente. Maior número e tamanho da maior raiz (28,07 e 29,07 mm), foi obtido com 1/0 mg L-1 de ANA/BAP. Comitê Orientador: Dr. Renato Paiva - UFLA (Orientador); Dra. Patrícia Duarte de Oliveira Paiva (Co-orientadora); Dr. Breno Regis Santos (Co-orientador)