Micropropagação e análise de constituintes voláteis in vitro de Hyptis suaveolens (L.) Poit.

Hyptis suaveolens é uma planta medicinal, cujo óleo essencial possui atividades antimicrobinana e tóxica para insetos. Objetivou-se avaliar condições para o cultivo e produção de constituintes voláteis in vitro de H. suaveolens. Na primeira etapa avaliou-se: 1) MS; MS/2 e MS/4 em fatorial com quatro concentrações de sacarose: 7,5; 15; 30 e 40 g.L-1 na germinação de sementes in vitro; 2) MS/2 e MS/4 em combinação com 20; 25; 30; 35; 40 e 45 g.L-1 de sacarose no estabelecimento de segmentos apicais e nodais; 3) a orientação do explante (horizontal ou vertical); 4) 2MS, MS, MS/2 e MS/4 no crescimento in vitro; 5) porcentagem de pegamento na aclimatização das mudas em casa de vegetação. A germinação de sementes em MS e MS/2, com 15 e 30 g.L-1 de sacarose, respectivamente, apresentaram melhor desenvolvimento de plântulas. No entanto, as concentrações de 7,5 e 15 g.L-1 de sacarose tiveram o mais rápido tempo médio de germinação (6 e 7 a 8 dias respectivamente). Os meios MS/2 e MS/4, ambos com 30 g.L-1 de sacarose, foram os melhores meios para o estabelecimento de segmentos apicais e nodais, respectivamente. Para crescimento in vitro, o MS/2 proporcionou conjuntamente maior biomassa seca de folhas e de raízes de plântulas, e as analises por HS-CG-EM detectaram mais compostos voláteis para MS/4 e MS/2. A orientação horizontal do explante proporcionou melhores resultados. Houve 90% da porcentagem de pegamento na aclimatização de plântulas com Tropstrato HA®. Na segunda etapa avaliou-se: 1) TDZ e BAP, com 0; 1 e 2 mg.L-1 em interação com 0; 0,5 e 1 mg.L-1 de ANA; e 0; 0,05; 0,1; 0,2 e 0,4 mg.L-1 de BAP em interação com 0 e 0,25 mg.L-1de AIA; 2) densidades de fluxo de fótons (13; 28; 47 e 69 µmol m -2.s-1); 3) qualidades espectrais de luz [LED: azul, vermelha, amarela, branca, verde, azul:vermelha (4:10), azul:vermelha (10:4) e azul:vermelha (7:7); e luz fluorescente com intensidade de 47 µmol m -2.s-1,]; 4) a influência de diferentes ambientes na produção de constituintes voláteis (plântulas originadas de sementes cultivadas in vitro por 70 dias em MS com 15 g.L-1 de sacarose, plântulas originadas de segmentos vindos da casa de vegetação cultivadas in vitro em MS/4 com 30 g.L-1de sacarose por 60 dias, plantas com 90 dias cultivadas em areia com fertirrigação em casa de vegetação e plantas cultivadas em canteiros com terra). Observou-se um efeito negativo das citocininas e auxinas na formação de novos brotos. Plântulas cultivadas em 47 e 69 µmol m 2s-1 tiveram maior crescimento in vitro, mas a maior intensidade de luz inibiu a síntese de alguns compostos voláteis. A luz fluorescente causou maior inibição na produção de constituintes voláteis e no crescimento vegetativo. LEDs azul, vermelha, branca ou combinações de vermelha com azul incrementaram variáveis de crescimento. A produção de constituintes voláteis é altamente influenciada pelo tipo de ambiente de cultivo e de material propagativo.Dissertação apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Agronomia/Fitotecnia, área de concentração em Produção Vegetal, para a obtenção do título de Mestre