Avaliação do potencial enzimático de fungos filamentosos e otimização da produção de celulases por Aspergillus sulphureus (Fresen) Wehmer

A tecnologia enzimática é, hoje, um dos campos mais promissores dentro das novas tecnologias para a síntese de compostos de alto valor agregado. Diante de tal oportunidade, o presente trabalho foi realizado com o objetivo avaliar e caracterizar fungos filamentosos quanto à produção qualitativa das enzimas amilase, celulase, pectinase e protease. Avaliou-se também a produção quantitativa das enzimas exo β-1,4 glucanase e exo β-1,4 glucanase pelo fungo Aspergillus sulphureus (EPAMIG/FA14), sob diferentes condições de temperatura (30 °C, 35 °C e 40 °C), concentrações de substrato (0,5%, 1,0% e 1,5%) e pH (6,0; 7,0 e 8,0). Os isolados fúngicos utilizados pertencem à micoteca do Ecocentro/EPAMIG e ao Laboratório de Micotoxinas e Micologia de Alimentos da UFLA. A partir desses, procedeu-se à qualificação das enzimas em condições laboratoriais. Quarenta isolados foram avaliados quanto à produção de celulases, proteases, pectinases e amilases. Destes, 15 produziram celulases, 13 produziram proteases, 13 produziram pectinases e não foram encontrados halos que comprovassem a produção de amilases. Além desses, mais 20 isolados foram acrescidos aos 40, para a detecção de pectinases e amilases por outra metodologia, em que 32 produziram pectinases e, novamente, não foram obtidos resultados positivos na detecção de amilases. A fim de avaliar a melhor condição de cultivo para a produção quantitativa das enzimas exo β- 1,4 glucanase e endo β- 1,4 glucanase pelo fungo Aspergillus sulphureus, procedeu-se à quantificação das mesmas sob as condições estabelecidas. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente por análise de variância e plotados em gráficos de superfície de resposta e contorno. Entre as variáveis testadas, a condição ótima de cultivo para A. sulphureus, para maior produção da exo β-1,4 glucanase foi: pH = 8,0, temperatura = 40 °C e concentração de substrato = 1,5%. Para endoglucanases, verificou-se que a condição ótima de cultivo para a produção foi encontrada entre 30 °C e 35 °C, pH entre 6,0 e 7,0 e concentração de 1,5% de CMC. No presente estudo, as diferentes condições de fermentação submersa foram otimizadas para a produção de celulases por A. sulphureus e este se mostrou um promissor produtor de endo e exoglucanases, podendo ser futuramente utilizado em indústrias e afins.Dissertação apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Microbiologia Agrícola, área de concentração Microbiologia Agrícola para a obtenção do título de Mestre