Micropropagação, teor e composição química volátil de Hyptis marrubioides Epl. e atividade inseticida

Na primeira parte do projeto o objetivo foi avaliar fatores que influenciam o crescimento in vitro de Hyptis marrubioides através da cultura nodal, onde foram conduzidos quatro experimentos. No primeiro, foram avaliados quatro volumes de meio de cultura (10, 20, 30 e 40 mL); no segundo a orientação do explante (vertical e horizontal); no terceiro, quatro posições do segmento nodal no explante (1º, 2º, 3º e 4º segmentos nodais) e posição apical. No quarto experimento, avaliou-se a taxa de multiplicação in vitro em função da origem do explante. Após 40 a 45 dias foram avaliados o comprimento da brotação (CB), comprimento da raiz (CR), biomassa seca da parte aérea (BSPA) e da raiz (BSR), número de brotações (NB) e de nós (NN). O crescimento in vitro de H. marrubioides foi superior utilizando-se 40 mL de meio de cultura e segmentos nodais inoculados em posição horizontal com 2 pares de gemas. Posições mais próximas ao ápice do explante apresentaram comprimento superior do maior broto, maiores acúmulos de biomassa seca da parte aérea e da raiz e comprimento da raiz. A maior taxa de multiplicação (4,06) foi obtida no terceiro subcultivo com a utilização de gemas apicais como fonte de explantes. Nesta primeira parte do projeto, plantas de H. marrubioides cultivadas in vivo e in vitro foram analisadas para determinação dos compostos do óleo essencial através de HS – GC/MS. A cultura nodal mostrou-se um método eficiente para propagação clonal de H. marrubioides, pois não interferiu na composição química da fração volátil. Na segunda parte do projeto foi estudado o teor e a composição química do óleo volátil em folhas e inflorescências frescas de H. marrubioides coletadas em diferentes localidades do Sul de Minas Gerais. O óleo essencial foi extraído por hidrodestilação e analisado por CG-EM. Foram realizadas análises de componentes principais (PCA) e de agrupamento hierárquico (HCA). O local de coleta influenciou no teor de óleo essencial de folhas e inflorescências de hortelã-do-campo. O maior teor de óleo essencial foi mensurado nas folhas de H. marrubioides provenientes do município de Luminárias (0,14%). Os principais constituintes químicos identificados nos acessos foram a -tujona (6,72-19,3%), a β-tujona (8,40-24,20%), a cis-pinocanfona (2,68-5,71%), -copaeno (4,43-9,25%), β-cariofileno (7,24-11,49%) e o -muuroleno (6,73-12,02%). De acordo com as análises de PCA e HCA foi possível concluir que há um grande polimorfismo químico entre as amostras dos óleos essenciais. Na terceira parte do projeto foi conduzido um bioensaio com o objetivo de realizar a caracterização química e avaliar a atividade inseticida do óleo essencial de H. marrubioides e de uma mistura isomérica comercial de α+β-tujona sobre Atta sexdens rubropilosa. Os constituintes majoritários presentes no óleo essencial foram: β-tujona (40,8%), α-tujona (16,1%) e sabineno (15,9%), seguidos pelos constituintes 10S,11S-himachala-3(12),4-dieno (4,4%), cis-pinocanfona (4,0%) e β-cariofileno (3,9%). A aplicação tópica do óleo essencial das inflorescências de H. marrubioides na dose de 28,5% de α + β-tujona indicou efetiva toxicidade em formigas cortadeiras. Essa dose de α + β-tujona do óleo apresentou uma TL50 estimada de 3,06 diasTese apresentada à Universidade Federal de Lavras, como parte das exigências do Programa de Pós-Graduação em Agronomia/Fitotecnia, área de concentração Produção Vegetal, para a obtenção do título de Douto