Análise microbiológica de pontas de cateteres venosos centrais de pacientes do Hospital Universitário - Londrina - Paraná

Cateteres venosos centrais (CVC) são utilizados com a finalidade de facilitar o diagnóstico e o tratamento de pacientes hospitalizados. Entretanto, o uso destes oferece riscos de infecção local e sistêmica. Staphylococcus aureus e S. epidermidis são agentes etiológicos de infecções relacionadas a CVC e possuem a capacidade de produzir biofilme. A formação do biofilme depende da produção de uma substância chamada Polysaccharide Intercellular Adhesin (PIA) sintetizada pelo operon ica. O presente trabalho teve por objetivos isolar e identificar microrganismos de pontas de CVC de pacientes internados entre junho de 2003 à junho de 2004, no Hospital Universitário (HU) da Universidade Estadual de Londrina (UEL). Estabelecer o perfil de resistência dos isolados frente a anti-sépticos, desinfetantes, e antimicrobianos e realizar a ribotipagem de cepas de S. aureus e S. epidermidis através da técnica Ribosome Spacer-Polymerase Chain Reaction (RS-PCR). Investigar a presença dos genes icaA e icaD nessas cepas através do método da Polymerase Chain Reaction (PCR), verificar a expressão fenotípica de biofilme através dos testes em Microplaca de Poliestireno (MP) e em Ágar Vermelho Congo (AVC) e avaliar a eficácia desses métodos utilizados na detecção de cepas produtoras de biofilme. Neste estudo, 198 pontas de CVC foram avaliadas e 105 (53%) foram consideradas positivas, pois apresentaram crescimento microbiano igual ou superior a 15 Unidades Formadoras de Colônia (UFC). Os microrganismos mais isolados foram: Estafilococos coagulase-negativa (ECN) (35,2%), S. aureus (25,7%), Klebsiella pneumoniae (8,5%), Acinetobacter baumannii (7,6%), Pseudomonas aeruginosa (7,6%), e Candida albicans (4,7%). Todas as bactérias estudadas foram sensíveis ao PVP-I degermante 10%, Clorexidina alcoólica 0,5%, Clorexidina degermante 2%, e ao Ácido peracético 0,5%. Duas (4%) cepas de Staphylococcus sp. foram resistentes ao PVP-I tópico 10% e 3 (6%) resistentes ao Hipoclorito de sódio 1%. Entre as bactérias Gram-negativas, 1 (4%) foi resistente ao PVP-I tópico 10% e 4 (16%) resistentes ao Hipoclorito de sódio 1%. O perfil de resistência de cepas de ECN e S. aureus aos antimicrobianos foi: ciprofloxacina (81,5 e 91,3%), eritromicina (81,5 e 100%), gentamicina (81,5 e 91,3%), oxacilina (96,3 e 95,7%), penicilina (100%), respectivamente. Nenhuma cepa apresentou resistência a vancomicina. O perfil de resistência apresentado por A. baummannii, P. aeruginosa e K. pneumoniae foi: amicacina (100, 75 e 60%), ampicilina-sulbactam (50, 62,5, e 100%) cefotaxima (100%), ceftazidima (100%), ciprofloxacina (100, 87,5, e 40%), gentamicina (100, 100 e 80%), respectivamente. A. baumannii e P. aeruginosa apresentaram 37,5% e 75% de resistência ao imipenem, e todas as cepas de K. pneumoniae foram sensíveis. Cem por cento (100%) das cepas de A. baumannii foram sensíveis ao meropenem e 37,5% das cepas de P. aeruginosa foram resistentes ao meropenem, mas sensíveis a colistina. A tipagem molecular mostrou 6 diferentes perfis de ribotipagem para S. aureus. O perfil I foi verificado em 21 (80,8%) das cepas que também foram multiresistentes a antimicrobianos. Destas, 18 (69,2%) cepas de S. aureus apresentaram a mesma biotipagem, perfil de resistência a antimicrobianos e ribotipagem. Observou-se que os outros perfis de ribotipagem encontrados (perfil II-VI) estavam associados com cepas de S. aureus que mostraram uma menor resistência a antimicrobianos. S. epidermidis apresentaram biotipagem e perfil de resistência a antimicrobianos diferentes, porém o mesmo perfil de ribotipagem. Os genes icaA1 e icaD1 foram detectados em 22 (95,7%) cepas de S. aureus e os genes icaA2 e icaD2 em 16 (80%) cepas de S. epidermidis. Todos os isolados estudados de S. aureus e 19 (95%) de S. epidermidis foram produtores de biofilme em MP. Apenas 1 (4,3%) cepa de S. aureus e 7 (35%) de S. epidermidis foram positivas em AVC. A identificação de microrganismos isolados em pontas de CVC e o conhecimento do perfil de resistência destes frente aos anti-sépticos, desinfetantes e antimicrobianos são de extrema importância para o controle de infecções e para a determinação de ações terapêuticas e epidemiológicas. A técnica de RS-PCR pode ser usada para tipagem de cepas de S. aureus, por ser um método rápido, barato e reprodutível. O método PCR permitiu a detecção de genes ica nos isolados analisados de S. aureus e S. epidermidis e o teste em MP foi mais eficaz para a detecção fenotípica de biofilme do que o AVC