An??lise do potencial de Bacillus thuringiensis como agente de controle de Spdoptera frugiperda (Lepidoptera, Noctuidae) e Ostrinia nubilalis (Lepidoptera, Pyralidae)

A bact??ria Bacillus thuringiensis exibe alta atividade t??xica espec??fica para insetos devido ?? sintese de delta-endotoxinas, codificadas por genes cry. A presente pesquisa visou avaliar a atividade t??xica de cepas de Bacillus thuringiensis oriundas de regi??es oriz??colas do Estado do Rio Grande do Sul, como agente de controle de insetos-praga da cultura do arroz irrigado e milho Spodoptera frugiperda e Ostrinia nubilalis, a fim de selecionar cepas potenciais para o controle das mesmas e identificar se as atividades enzim??ticas dos receptores alcalino fosfatase (ALP) e aminopeptidase (APN) podem ter um importante papel na resist??ncia de B. thuringiensis. Neste trabalho foram utilizados testes fenot??picos e t??cnicas de PCR para a identifica????o das subclasses do gene cry1; perfil de prote??nas para a observa????o da composi????o do complexo esporo-cristal, rep-PCR para a observa????o da variabilidade gen??tica, DNA plasmidial, quantifica????o das enzimas ALP e APN para se observer perfil de resist??ncia das cepas e a atividade t??xica frente aos insetos-praga. Os ensaios de quantifica????o de prote??nas de ALP e APN apresentaram n??veis reduzidos, sendo um biomarcador potencial para a resist??ncia de toxinas Cry. Os resultados dos estudos de rep-PCR demonstraram um elevado grau de similaridade entre as regi??es oriz??colas, provavelmente associadas ?? especia????o ecol??gica. Na caracteriza????o do perfil prot??ico, os resultados revelaram diferen??as entre as cepas em estudo, sendo algumas semelhantes ??quelas utilizadas como padr??o da an??lise (Bt. thuringiensis 4412; Bti IPS 82 e Bt. sorovar HD1). Nos ensaios do perfil plasmidial, as cepas formaram tr??s padr??es distintos. Para os dados de toxicidades avaliados pelos bioensaios com as lagartas de primeiro ??nstar de O. nubilalis, todas as cepas testadas apresentaram mortalidade superior a 75%, com destaque ?? cepa Bt.1893-15 que causou 95%. Nos dados dos ensaios biol??gicos realizados contra as lagartas de S. frugiperda, a cepa Bt. 3420-11 destacou-se com mortalidade superior a 88%.The bacterium Bacillus thuringiensis presents a high specific activity against insects due to delta-endotoxin syntheses, codified by cry genes. This study aimed to evaluate the toxic activity of strains of B. thuringiensis derived from rice fields of Rio Grande do Sul, as an agent of control of insect pest of rice and corn Spodoptera frugiperda and Ostrinia nubilalis, in order to select potential strains to control and identify whether the enzymatic activity of alkaline-phosphatase (ALP) and aminopeptidase (APN) receptors may play an important role in the resistance of B. thuringiensis. In this study we used phenotypic tests and PCR techniques to identify subclasses of gene cry1; proteins profile to observe the composition of the spore- crystal complex, rep-PCR for the observation of genetic variability, plasmid DNA, quantification of the enzymes ALP and APN to observe resistance profile of strains and bioassay capacity against insect pests. Assays for quantification of proteins ALP and APN showed reduced levels being a potential biomarker for resistance to Cry toxins. The results of studies of rep-PCR demonstrated a high degree of similarity between the rice regions, probably associated with ecological speciation. Regarding the protein profile characterization, the results revealed differences between the strains, some being similar to those used as standard analysis (Bt thuringiensis 4412, Bt IPS 82 and Bt HD1). In trials of plasmid profile, the strains formed three distinct patterns. In data and toxicity assessed by bioassays against first instar O. nubilalis larvae, all tested strains showed mortality exceeding 75%, highlighting the Bt strain 1893-15, which caused 95% mortality. In the data of the biological assays conducted against S. frugiperda larvae, the Bt strain 3420-11 stood out showing mortality greater than 88%