Leptin in swine females: relationship between reproductive status and culling causes

A leptina ?? um horm??nio pept??dico multifuncional, produzido primariamente pelo tecido adiposo, com receptores (Ob-Rs) presentes em ??rg??os reprodutivos, hipot??lamo e hip??fise, que atua na regula????o do apetite e no gasto energ??tico, com potencial influ??ncia sobre a express??o da fun????o reprodutiva, na puberdade e ap??s a lacta????o. Desordens reprodutivas s??o as causas mais comuns, atribu??das ao total dos descartes, entre 30 e 40%. Considerando a alta propor????o de descartes por estes problemas, a avalia????o dos ??rg??os genitais no abate tem importante valor diagn??stico, auxiliando na identifica????o do est??gio do ciclo estral da f??mea e na interpreta????o de poss??veis anormalidades reprodutivas. O seu receptor de forma longa (OBR-b) realiza transdu????o de sinal em diversos tipos celulares via cascata das prote??nas quinases ativadas por mit??genos (MAPK), tais como ERK 1/2 e p38. A primeira etapa do trabalho teve por objetivo avaliar a presen??a da leptina, e das MAPK nos o??citos de f??meas su??nas p??beres e pr??-p??beres. Envolveu ov??rios de 10 f??meas pr??-p??beres e 10 p??beres coletados no abate e l??minas foram analisadas de o??citos inclusos em fol??culos primordiais/prim??rios (OIFP), secund??rios (OIFS) e terci??rios (OIFT). Para a t??cnica de imuno-histoqu??mica (IHQ) os anticorpos policlonais instilados foram anti-leptina, anti-phospho- MAPK (ERK 1/2 e p38). A segunda etapa envolveu 28 porcas p??beres descartadas, das quais foram analisados os neur??nios do hipot??lamo, gl??ndulas endometriais e o??citos. Para a IHQ foram utilizados anticorpos policlonais anti-leptina e anti-receptor da leptina e objetivou comparar as respostas com os dados produtivos e reprodutivos a partir do registro de cada f??mea. Em ambas as etapas de trabalho foram utilizadas as modas obtidas pelo aplicativo 16 Bit-Histograma do software Image J??. A imunomarca????o da leptina e a presen??a de ERK 1/2 ativada MAPK foram mais intensas em o??citos de porcas (p&#8804;0,05), enquanto que a marca????o para p38 MAPK ativada foi mais intensa em o??citos de leitoas (p=0,05). Em porcas, os OIFP estavam mais intensamente marcados para a leptina e p38 MAPK (p<0,05), mas para leitoas n??o foi observada diferen??a na marca????o dos o??citos independente do est??dio folicular. No hipot??lamo a imunomarca????o para a leptina foi mais intensa nas porcas descartadas por problemas reprodutivos (p<0,05). O hipot??lamo, ??tero e o??citos das porcas que estavam na fase l??tea ou fase folicular apresentaram imunomarca????o para leptina e OBR-b mais acentuada que naquelas que possu??am cistos ovarianos. A imunomarca????o para a leptina foi mais acentuada no hipot??lamo e ??tero daquelas porcas do grupo ordem de parto 2 (OP 2-4) (p<0,05). Estes resultados demonstram que a leptina pode ser um dos marcadores para compet??ncia oocit??ria. Al??m disso, pode tamb??m ser observado que f??meas c??clicas com OP 2-4 partos apresentam imunomarca????o mais intensa para leptina no hipot??lamo e ??tero, e OBR-b nos o??citos e ??tero. O OBR-b obteve marca????o mais acentuada em f??meas prim??paras e mult??paras, que nul??paras. Portanto, a imunomarca????o para leptina e OBR-b podem ser um marcador de sinaliza????o reprodutivo em f??meas su??nas.Leptin is a multifunctional peptidic hormone, primarily produced by the adipose tissue, which has receptors (Ob-Rs) in reproductive organs, hypothalamus and hypophysis, acting in the appetite regulation and energetic expenditure, potentially influencing the expression of the reproductive function, at puberty and lactation. Reproductive failure are the main causes for female culling, representing 30% to 40%,of the total female culling. Thus, post-mortem evaluation of the genital organs at slaughter may have an important diagnostic value, helping on the identification of the stage of female`s estrous cycle and aiding the interpretation of reproductive abnormalities. Its long form receptor (OBR-b) performs signal transduction in several cell types via mitogen- activated protein kinases (MAPK) cascade, such as ERK 1/2 and p38. The first stage of this thesis is aimed to evaluate the presence of leptin and MPAK in oocites of pubertal sows and prepubertal gilts. Ovaries from 10 pubertal sows and 10 prepubertal gilts were collected at a slaughterhouse. Slides were analyzed for the presence of oocites included in primordial/primary (OIPF), secondary (OISF) and tertiary follicles (OITF). Immunohistochemistry (IHC) was performed with polyclonal antibodies anti-leptin and anti-phospho-MAPK (ERK 1/2 and p38). The second stage involved 28 pubertal sows and the analyses were performed in hypothalamic neurons, endometrial glands and oocytes. For IHC, the antibodies were polyclonal anti-leptin and anti-leptin receptor. Responses were compared with reproductive data registered for each female. All images in both stages were analyzed by 16-Bit Histogram application from Image J?? software. Immunolabeling for leptin and activated ERK 1/2 MAPK were more intense in sows oocytes (p &#8804; 0.05), while the immunolabeling for activated p38 MAPK was more intense in gilts oocytes (p = 0.05). In sows, OIPF were more intensely marked for leptin and p38 MAPK (p <0.05), on the other hand, for gilts there was no difference in the marking of follicular oocytes from the analyzed categories. Hypothalamic neurons were more intensely marked in the sows culled by reproductive problems (p <0.05). The hypothalamus, uterus and oocytes of luteal or follicular phase sows showed more intense immunolabeling for leptin and OBR-b than the females with cystic ovaries. The immunolabeling for leptin was more pronounced in the hypothalamus and uterus of sows from parity order 2 group (PO 2-4) (p