Propagation in vitro and molecular characterization of Alternanthera genotypes

As plantas s??o fontes importantes de produtos naturais biologicamente ativos, muitos dos quais se constituem em modelos experimentais para a s??ntese de novos f??rmacos. O g??nero Alternanthera ?? conhecido por possuir plantas com propriedades medicinais e empregadas com esta finalidade pela medicina popular. Dentre elas destacam-se a A. dentata Moench., A. brasiliana L., A. tenella Colla e A. philoxeroides Mart., com propriedades diur??tica, antiinflamat??ria, digestiva, hepatoprotetora, antioxidante, analg??sica, antibi??tica, antitumoral e depurativa. Nos ??ltimos anos tem ocorrido um aumento da demanda por plantas com propriedades medicinais, fazendo-se necess??rio estudos mais aprofundados em rela????o ??s caracter??sticas morfol??gicas, fisiol??gicas e moleculares destes vegetais. O objetivo deste estudo foi avaliar o processo de micropropaga????o, otimizando o sistema de cultivo in vitro, e verificar a similaridade gen??tica entre os gen??tipos das plantas coletadas em diferentes localidades da Regi??o Sul do Brasil. Inicialmente foram executados os procedimentos b??sicos de micropropaga????o, incluindo as etapas de estabelecimento in vitro, multiplica????o e aclimatiza????o. Na micropropaga????o foram utilizadas diferentes combina????es de BAP (0,0; 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 e 2,5 mg L-1) e ANA (0,0 e 1,0 mg L-1) e avaliados os par??metros de crescimento. Constatou-se que, o melhor meio para o cultivo in vitro Alternanthera brasiliana foi o MS sem adi????o de fitorreguladores e este meio adicionado de 1,0 mg L-1 de ANA, sem a adi????o de BAP. Nestes meios desenvolveram-se plantas aptas para a aclimatiza????o. A adi????o de 1,0 mg L-1 de ANA na etapa de cultivo in vitro melhorou o desenvolvimento do sistema radicular durante a fase de aclimatiza????o. A an??lise molecular foi realizada utilizando-se a t??cnica de RAPD. Foi verificada a poss??vel exist??ncia de variabilidade entre plantas de Altenanthera brasiliana e o potencial da t??cnica em detectar variabilidade intra e interespec??fica de A. dentata, A. philoxeroides, vii A. brasiliana, A. tenella e A. sessilis provenientes de diferentes locais da Regi??o Sul do Brasil. N??o foi poss??vel constatar polimorfismo entre as plantas de A. brasiliana e entre as plantas de A. dentata. No entanto, foi poss??vel diferenciar as seis diferentes esp??cies analisadas e observar variabilidade entre as plantas de A. philoxeroides e A. tenella.The plants are biologically important sources of natural actives products, many of the which are constituted in experimental models for the synthesis of new medicines. The genus Alternanthera is known by possessing plants with medicinal properties and are employed with this purpose for the popular medicine. Among they stand out A. dentata Moench., A. brasiliana L., A. tenella Colla and A. philoxeroides Mart., with diuretic properties, anti-inflammatory, digestive, hepatic-protector, antioxidant, analgesic, antibiotic, anti-tumor and depurifying effect. In the last years, it was verified an increase demand for medicinal plants and it is made necessary studies in relation to the morphologic, physiologic and molecular characteristics of these plants species. The objective of this study was to evaluate the micropropagation process, optimizing the cultivation in vitro system, and to verify the genetic similarity among the plants collected at different places of the South Area of Brazil. The basic procedures of micropropaga????o include the in vitro establishment, multiplication and aclimatization of the plantlets. In the micropropagation different BAP (0.0; 0.5; 1.0; 1.5; 2.0 and 2.5 mg L-1) and ANA (0.0 and 1,0 mg L-1) concentrations were used and growth parameters was evaluated. It was verified for Alternanthera dentate brasiliana that the best medium for the in vitro cultivation was MS medium without plant growth regulators and in the medium added of ANA (1.0 mg L-1), without the BAP addition. In these medium the plants developed sufficient to the acclimatization stage. The addition of 1,0 mg L-1 of ANA in the stage of in vitro cultivation improved the root system development during the aclimatiza????o stage. The molecular analysis was conduced using the RAPD technique, in order to look for a possible polymorphisms among the genotypes of Alternanthera brasiliana and the potential of the technique in detecting variability intra and interespecific of A. dentata, A. philoxeroides, A. brasiliana, A. tenella, and A. sessilis plants harvesting at different places of the South Area of Brazil. Through the RAPD technique it was not possible to verify polymorphisms among the A. brasiliana plants and among the A. dentata ix plants. However, it was possible to differentiate the six different analyzed species and to observe variability among the plants of A. philoxeroides and A. tenella