Evaluación microbiológica, analgésica, antiinflamatoria, antioxidante e identificación de los metabolitos mayoritarios de Dunalia spinosa, solanaceae, especie vegetal pre-andina chilena

Memoria para optar al título de Químico FarmacéuticoDunalia spinosa (Meyer) Dammer (Solanaceae), n.v. chumu-chumi, yara, chilca hembra, es un arbusto que crece en la precordillera de la región de Tarapacá, provincia de Arica, I Región de Chile. La medicina folclórica le atribuye propiedades para el dolor de muelas, problemas respiratorios y lavado de heridas, No existen antecedentes acerca de estudios químicos ni farmacológicos. La recolección del material vegetal (parte aérea) fue realizada en el pueblo de Socoroma (3.000 msnm), conservándose un testigo en el herbario de la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacéuticas de la Universidad de Chile (SQF Nº 22256). La obtención de los extractos se realizó de los ejemplares colectados y aún frescos. El exudado resinoso (ERES) fue obtenido por inmersión de la parte aérea de la planta en diclorometano. Luego el material vegetal extraído fue secado, molido y sometido a extracción secuencial con disolventes de polaridad creciente obteniéndose los extractos hexano (EHEX), diclorometano (EDCM), acetato de etilo (EAET) y metanólico /EMET). La actividad antimicrobioana evaluada mediante siembra radial fue encontrada en los extractos; ERES y EDCM, presentando actividad frente a las bacterias Gram (+): B. subtilis y M. flavus y Gram (-): E. coli, siendo inactivos para los hongos C. albicans y S. cerevisiae. Mediante el bioensayo bioensayo bioautografía se verificó la actividad antibacteriana frente a las mismas bacterias, además de S.aureus y K. pneumoniae por parte de los extractos y los compuestos aislados DU-1 y DU-2. Luego se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI) para DU-1 frente a una bacteria Gram (-): E. coli y una Gram (+): S. aureus, dando como resultado para E. coli: 30ug/mL, siendo el fármaco de referencia cloramfenicol con una CMI < 5 ug/mL; y para S. aureus: 80 ug/mL usando como fármaco de referencia ampicilina con una CMI de 5 ug/mL. La actividad analgésica tópica in vivo fue determinada por el test de formalina, utilizando como fármaco de referencia ibuprofeno, observándose que todos los extractos estudiados presentaron actividad, siendo ésta mayor en lo extractos menos polares. La actividad antiinflamatoria tópica in vivo fue estudiada mediante el método de edema en oreja de ratón utilizando ácido araquidónico (AA) y 12-miristato-13-acetato forbol (TPA) como agentes inflamatorios y como fármacos de referencia se utilizaron nimesulida e indometacina respectivamente. Los extractos ERES, EACET, EMET e INF presentaron actividad frente al edema producido por TPA. Debido a estos resultados se evaluó la actividad antiinflamatoria del compuesto aislado DU-1 frente a AA, el cual no presentó actividad. Con el fin de evaluar la actividad atrapadora de radicales libres, se realizó el ensayo de inhibición de la enzima xantina osidasa (X.O.), donde se utilizó como fármaco de referencia alopurinol, Sólo el EDCM presentó una leve actividad, ninguno de los otros extractos fue activo. Para aislar los metabolitos activos se realizó un fraccionamiento desde el ERES mediante columnas rápidas de gel de sílice y columnas de Sephadex obteniéndose las sustancias DU-1 y DU-2. De estas dos sustancias se identificó DU-1 mediante un completo estudio espectroscópico del cuál se obtuvo que el compuesto corresponde a un withanólido, el: 26-δ-lactona-1-oxo-4β, 27-dihidroxi-5,6-epoxi-ergostano-2,24-dieno, conocido con el nombre de withaferina A. Con los resultados encontrados hasta ahora, quedan respaldados científicamente los usos y las propiedades que la medicina folclórica atribuye a esta especie para el dolor de muelas, lavado de heridas y problemas respiratorios y la validan como planta medicina