Cloning and analysis of phosphoenolpyruvate carboxylase （PEPC） gene of Dunaliella salina

为研究杜氏盐藻（Dunaliella salina）磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC）基因的功能, 根据莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）、拟南芥（Arabidopsis thaliana）、花生（Arachis hypogaea）等真核生物PEPC 基因高度保守序列, 设计一对简并引物, 通过RT-PCR 的方法获得杜氏盐藻PEPC 基因部分序列, 然后采用RACE 的方法分别克隆到5′端和3′端序列, 拼接后得到全长cDNA, 其长度为3 523bp, 包含2 949 bp 的完整开放阅读框, 编码982 个氨基酸, 相对分子质量为110560.5。氨基酸序列与已知物种PEPC 序列的同源性依次为： Chlamydomonas reinhardtii 69%, Chlorellavariabilis 55%, Ostreococcus tauri 50%和Ostreococcus lucimarinus CCE9901 49%, 表明所克隆的序列确为杜氏盐藻PEPC cDNA 序列