Techniques for the isolation and purification of sarcocystis aucheniae oocysts from small intestine of experimentally infected dogs.

ZACARÍAS S., Fiorella, SAM T., Rosa, RAMOS D., Daphne [et al.]. Técnicas de aislamiento y purificación de ooquistes de Sarcocystis aucheniae a partir de intestino delgado de perros experimentalmente infectados. Revista de Investigaciones Veterinarias del Perú [en línea]. 2013, vol. 24, no. 3, p. 396-403. ISSN 1682-3419.Se evalúan procedimientos para la rápida y eficiente purificación de ooquistes y eporoquistes de Sarcocystis aucheniae (Sa), a partir del intestino delgado de perros experimentalmente infectados vía oral con 400 macroquistes de Sa provenientes de carne de alpacas naturalmente infectadas. Se recolectó la mucosa del intestino delgado. Las muestras fueron lavadas por centrifugación con buffer salino fosfato y homogenizadas y centrifugadas. Se obtuvo grandes cantidades de ooquistes adheridos a las microvellosidades intestinales. En el primer procedimiento, los ooquistes recibieron un tratamiento enzimático con tripsina al 5% resultando 50% de separación. En el segundo fueron tratados con una solución de hipoclorito de sodio al 2.6% lográndose una separación parcial (80%). En el tercero fueron centrifugados con una gradiente de densidad discontinua de bromuro de potasio obteniéndose una separación de 99%. Este último procedimiento permitió la obtención de ooquistes de Sa en cantidades relevantes, purificados y sin pérdida de la viabilidad