Variabilidade individual do sémen criopreservado em bodes de raça serpentina

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaO processo de criopreservação é responsável pela diminuição da qualidade seminal e torna mais clara a existência de uma variabilidade individual na qualidade do sémen descongelado. O principal objetivo do estudo foi analisar a variabilidade individual na criopreservação de sémen de bodes de raça Serpentina, no que diz respeito à congelabilidade dos seus ejaculados, através de uma avaliação subjetiva, de testes complementares e de uma avaliação objetiva. Descongelaram-se 40 palhinhas de sémen criopreservado obtidas a partir de ejaculados de 7 bodes, que foram examinadas por microscopia ótica para a avaliação da motilidade espermática progressiva (%) e foram realizados esfregaços para determinar a vitalidade e a percentagem de anisoespermia. Para avaliar a integridade das membranas plasmáticas dos espermatozoides, as amostras foram submetidas ao teste hipo-osmótico (HOST) e para avaliar o comportamento e resistência dos espermatozoides foram submetidas ao teste de termorresistência (TTR). Por último, foi realizada uma avaliação objetiva da cinética espermática através do sistema CASA. A percentagem de motilidade foi reduzida significativamente (p<0,001) de 80,88% no sémen fresco para 48,5% após a descongelação. Durante o estudo, os ejaculados foram classificados pelo nível de congelabilidade, de acordo com a sua motilidade pós descongelação: alto (>30%) e baixo (≤30%). Ejaculados com nível de congelabilidade alto apresentaram valores de motilidade (p<0,001), vitalidade (p<0,05) e de motilidade aos 120min do TTR (p<0.001) significativamente superiores aos de baixa congelabilidade. Na avaliação através do sistema CASA foram observadas diferenças estatisticamente significativas entre os ejaculados de congelabilidade alta e baixa nos seguintes parâmetros: MOT (p<0,001), MOTP (p<0,001), VAP (p<0,001), VCL (p<0,001), VSL (p<0,05), ALH (p<0,05), RAPID (p<0,001), MED (p<0,001) e STATIC (p<0,001). Considerou-se, neste estudo, que um bode que produz sémen de alta qualidade e congelabilidade teria de apresentar uma motilidade pós-descongelação média >30% e covariância <0,1. Assim, apenas os bodes 2121 e 2808 foram considerados indivíduos produtores de sémen de qualidade superior. Porém, só foram encontradas diferenças estatisticamente significativas entre indivíduos quanto à vitalidade, aos 5min do TTR e ao BCF. Este estudo demonstrou não existir uma variabilidade individual marcada na qualidade do sémen criopreservado dos bodes estudados. No entanto, os elevados valores de desvio padrão demonstram que os ejaculados de um mesmo macho são bastantes variáveis nas suas características seminais. A classificação e comparação dos ejaculados pelo seu nível de congelabilidade mostraram ser apropriadas e revelaram diferenças importantes na qualidade do sémen descongelado de bode.ABSTRACT - Individual variability of cryopreserved semen in Serpentina bucks - The cryopreservation process is responsible for the reduction of semen quality and makes clearer the existence of individual variability in the quality of thawed semen. The main objective of this study was to analyze the individual variability in the cryopreservation of Serpentino buck’s semen regarding the freezability of their ejaculates through a subjective evaluation, complementary tests and an objective evaluation. 40 straws of cryopreserved semen, referring to ejaculates of 7 bucks, were thawed and examined trough optical microscopy to evaluate the progressive motility of the sperm (%), smears were performed to determine sperm vitality and the percentage of sperm defects. To evaluate the integrity of the sperm’s plasma membranes, the samples were subjected to the hypoosmotic test (HOST) and to evaluate the sperm’s behavior and resistance the samples were subjected to the thermoresistance test (TTR). Lastly, the objective evaluation of sperm kinetics through a CASA system was performed. Sperm motility was significantly reduced (p<0.001) from 80.88% in fresh semen to 48.5% after thawing. In this study, the ejaculates were classified by their freezability level, according to their post-thaw motility: high (>30%) and low (≤30%). Ejaculates with high level of freezability showed motility (p<0.001), vitality (p<0.05) and motility at the TTR 120min (p<0.001) values that were significantly higher than the values of the low freezability ejaculates. The evaluation through the CASA system showed statistically significant differences between the ejaculates with different freezabily levels in the following parameters: MOT (p<0.001), MOTP (p<0.001), VAP (p<0.001), VCL (p<0.001), VSL (p<0.05), ALH (p<0.05), RAPID (p<0.001), MED (p<0.001) e STATIC (p<0.001). It was considered, in this study, that a buck that produces high quality and freezability semen must present a mean post-thaw motility >30% and covariance