Vývoj metody online extrakce tuhou fází ve spojení s kapalinovou chromatografií založené na polymerních monolitech pro stanovení dopaminu

Porous polymer monoliths have been used to develop an online solid-phase extraction with liquid chromatography method for determination of dopamine in urine as well as for a continuous monitoring of dopamine in flowing system. A polymerization mixture containing 4-vinylphenylboronic acid monomer has been used to prepare a trapping column based on specific ring formation reaction with dopamine cis-diol functionality. Additionally, a monolithic stationary phase with zwitterion functionality has been used to prepare capillary column for the separation of dopamine. Experimental conditions including molarity, pH, and flow rate of the loading buffer together with a valve switching time have been optimized to provide the highest recovery for dopamine. Experimental setup has been used to determine dopamine in a urine. By using both calibration curve and standard addition method, the dopamine level was determined to be 1.19 and 1.28 mg/L, respectively. Further, we have used experimental design to optimize coupling of two extraction monolithic loops to separation capillary column with monolithic phase for a comprehensive monitoring of dopamine. After multivariate analysis, sample loading flow-rate and a flow-rate of flushing buffer were selected as the most significant variables. Optimized experimental setup was applied to continuously monitor dopamine degradation.Porézní polymerní monolity byly využity k vývoji online extrakce tuhou fází ve spojení s kapalinovou chromatografií pro stanovení dopaminu v moči a také pro kontinuální monitorování dopaminu v průtokovém systému. Polymerizační směs obsahující monomer kyseliny 4-vinylfenylboronové byla použita pro přípravu sorpční kolonky založené na specifické reakci tvorby kruhu s dopaminovou cis-diolovou funkční skupinou. Kromě toho byla k přípravě kapilární kolony pro separaci dopaminu použita monolitická zwitterionová stacionární fáze. Experimentální podmínky, včetně molarity, pH a průtoku pufru, spolu s dobou přepínání ventilu byly optimalizovány tak, aby poskytovaly nejvyšší účinnost pro dopamin. Toto experimentální uspořádání bylo použito pro stanovení dopaminu v moči. Použitím jak kalibrační křivky, tak metody standardního přídavku byla hladina dopaminu stanovena na 1,19 a 1,28 mg/l. Dále jsme použili experimentální návrh pro optimalizaci vazby dvou extrakčních monolitických smyček na separační kapilární kolonu s monolitickou fází pro komplexní monitorování dopaminu. Na základě vícerozměrné analýzy byly jako nejvýznamnější proměnné vybrány průtokové rychlost dávkování vzorku a průtok proplachovacího pufru. Optimalizované experimentální uspořádání bylo použito pro kontinuální monitorování degradace dopaminu