Effects of di-(2-ethylhexyl) phthalate and four of its metabolites on steroidogenesis in MA-10 cells

Plasticizers aid in processing, and impart flexibility to plastics. Their broad use and tendency to leach out of polymers have rendered them ubiquitous in the environment. Phthalate plasticizers, in particular di-(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP), are known to cause male reproductive tract defects in animal models. It has been assumed that DEHP metabolite, mono-(2-ethylhexyl) phthalate (MEHP), is the active compound, however the bioactivity of metabolites such as 2-ethylhexanol, 2-ethylhexanal and 2-ethylhexanoic acid, has not been thoroughly investigated. The aim of this study was to test the effects of these compounds in a mouse Leydig tumour cell line, MA-10 cells. DEHP, MEHP and 2-ethylhexanal decreased cell viability, as well as steroidogenic potential as quantified by an enzyme-linked immunosorbent assay and gene expression analysis. Interestingly, 2-ethylhexanal was the most potent steroidogenic disruptor, which offered an intriguing contribution to the search for the mechanism(s) of phthalate toxicity and raised doubts that MEHP is the single active metabolite.Il est connu que les phtalates utilisés comme plastifiants et plus particulièrement les phtalates di-(2-éthylhexyle) (DEHP) sont à l'origine des malformations de l'appareil reproducteur masculin dans les modèles d'animaux. Ces plastifiants sont essentiels lors de la fabrication des plastiques pour leur donner de la flexibilité. Dus à une utilisation excessive de ces plastifiants et à leur capacité à s'échapper des plastiques existant, ces plastifiants sont maintenant omniprésents dans l'environnement. Dans cette étude, on fait l'hypothèse que le métabolite de DEHP, le phtalate mono-(2-éthylhexyle) (MEHP), est la molécule active, bien qu'il n'existe aucune autre étude concernant les métabolites comme 2-éthylhexanol, 2-éthylhexanal et l'acide 2-éthylhexanoïque. Le but de cette étude est d'évaluer les effets de ces produits chimiques sur une lignée cellulaire tumorale interstitielle du testicule de souris, les cellules MA-10. On a montré que le DEHP, le MEHP et le 2-éthylhexanal ont diminué la viabilité des cellules, aussi bien que la stéroïdogénèse qui a été quantifiée par la méthode ELISA et par l'analyse de l'expression génétique. Contre toute attente, le 2-éthylhexanal s'est avéré le plus puissant acteur dans la dégradation de la stéroïdogénèse, ce qui a ouvert une nouvelle avenue de recherche concernant le ou les mécanisme(s) impliqués dans la toxicité des plastifiants phtalates et a mis en doute le fait que le MEHP est le seul métabolite actif