Ultrastructural localization of thyroglobulin in rat thyroids using immunocytochemical and immunoradioautographic methods.

Antibodirs raised against rat thyroglobulin were labeled with the enzyme horseradish peroxidase, when sections of rat were placed in contact with the labeled antibodies, the staining for peroxidase revealed the sites of binding of the antibodies to the sections. In another series, the antibodies were labeled with radioactive 125I-iodide and tho sites of binding detected by radioautoqraphy. Light and electron microscopic study by either procedure revealed that the luminal colloid was the most active site of bindinq. Within follicular cel1s, the following organelles were labeled: rough endoplasmic reticulum, Golgi apparatus, apical vesicles and colloid droplets. The controls for specificity, sensitivity and methodology demonstrated that the sites of antibody binding were loci of thyroglobin antigenicity. Hence, thyroglobulin or its biological precursors were located in these sites. The use of radioiodine labeled antibodies made it possible to quantify the reactions by silver grain counting in radioautographs. The concentration of thyroglobulin antiqenicity was thus found to increase from rough endoplasmic reticulum to Golgi apparatus, apical vesicles and luminal colloid. Hence the concentration increased along the presumed pathway of thyroglobulin elaboration.Des anticorps contre la thyroglobuline de rat ont été marqués avec de la peroxydase do raifort et mis en contact avec des coupes de thyroïde de la même espèce: les anticorps liés aux coupes ont été mis en évidence par une réaction histochimique. Dans une autre série, les anticorps ont été marques à l'aide de l'iode radioactif 125I et ceux qui se sont liés aux coupes ont été détectés par la radioautographie. Dans les doux cas, microscopie photontque et électronique ont été utilisées pour localiser les anticorps liés. Une forte réaction s'observe au niveau du colloide thyroïdien. Des réactions apparaissent aussi au niveau des goutelettes de colloïde du cytoplasme, des vésicules apicales, de l'appareil de Golgi et du réticulum endoplasmique. Des tests de spécifité et de sensibilité des méthodes utilisées ont permis de conclure que les réactions sont dues à la présence de la thyroglobuline ou de ses précurseurs. L'étude quantitative des réactions radioautographiques a révélé que la concentration de l'antigénicité thyroglobulinique augmente du réticulum endoplasmique à l'appareil de Golgi, aux vésicules apicales et finalement au colloïde. Il y aurait donc une concentration progressive de la thyroglobuline alors qu'elle migre du réticulum endoplasmique par l'intermédiaire de l'appareil de Golgi et des vésicules apicales jusqu'à la lumière du follicule thyroïdien