Studies toward the primary structure of bacteriophage S13 DNA.

Spleen exonuclease and bacteriophage T4 induced polynucleotide kinase have been characterized with regard to their use in DNA sequence analysis and a model describing the action of polynucleotide kinase proposed. Interfering oligodeoxyribonucleotide-like contaminants in the polynucleotide kinase preparations were characterized and removed. A general method for the determination of the sequence of oligodeoxyribonucleotides of any base composition was developed. This involved partial spleen exonuclease degradation, 5' terminal labelling with polynucleotide kinase and [gamma-32P] ATP, and chain length fractionation of the labelled digest products. Several fractionation systems were compared with regard to their use in this method, in particular, and in DNA sequence analysis, in general. The sequences of long pyrimidine oligonucleotides from S13+ DNA were determined using this and two other methods; these sequences were compared with those from the DNA of bacteriophage OX174, and their significance regarding the evolutionary divergence of these alosely related bacteriophages examined.L'exonucléase de la rate et la polynucléotide kinase induite par le bacteriophage T4 ont été caractérisées a cause de leur utilité dans l'analyse séquentielle de l'ADN et un modèle décrivant l'action de la polynucléotide kinase est proposé. Des contaminants ressemblant a des oligodéoxyribonucléotides et interférant dans la préparation de la polynucléotide kinase ont été isolés et caractérisés. Une méthode générale est developée pour la détermination de la séquence des oligodéoxyribonucléotides composés de n'importe quelle base. Celle-ci consiste en la dégradation partielle de l'exonucléase de la rate, le marquage du bout 5' de la chaine a l'aide de la polynucléotide kinase et de ATP [Y-32P], et du fractionnement des produits marqués et digerés. Plusieurs séquences de fractionnement ont été comparés en raison de leur utilité dans cette methode en particulier, et dans l'analyse séquentielle de l'ADN en général. Les séquences de longs oligonucléotides pyrimidine de l'ADN du bactériophage S13+ ont été déterminées en utilisant cette methode de même que deux autres; ces séquences ont été comparées à celles de l'ADN du bactériophage OX174 et leur importance en regard de la divergence d'évolution de ces bactériophages étroitement reliés y est examinée