Studies on raw starch digesting amylase (II) pruification and characteristics of the enzyme

Cytophaga sp. 36小時之培養液，去除菌體後做為生澱粉水解鋂之粗酵素液，經硫酸 銨沉澱劃分、DEAE Sepharose CL-6B離子交換層析及Sephacry1-200 膠體過濾，使酵 素之純度提高為29倍，而仍有28％的回收率。此酵素對生澱粉作用之最適PH為6.0∼ 9.0 ，最適溫度為60℃。以澱粉水解法求得其作用於可溶性澱粉之Vmax為0.8 mg／ml ／min，而km 值為5.88mg／ml／。於可溶性澱粉基質中分別添加l0mM之葡萄糖與麥芽 糖，會使其Vmax降低，分別為0.3 mg／ml／min 及0.45mg／ml／min ；而km值亦降低 ，分別為0.56mg／ml及1.39mg／ml；因此屬於不兢爭型及無競爭型混合型之抑制作用 。此生澱粉水解鋂經具專一性醣蛋白水解鋂，N-Glycosidase 作用24小時之後，其活 性完全喪失，同時與大白鼠抗血清之免疫雙向擴散反應異於未被作用之生澱粉水解鋂 。 當生澱粉水解鋂作用於番薯及樹薯生澱粉在37℃反應3 天後，水解率為57％及38％； 當作用於馬鈴薯澱粉之直鏈澱粉及支鏈澱粉時，其水解率為42％及53％；而於玉米澱 粉的直鏈澱粉和支鏈澱粉時，則有36％及47％的水解率。而生澱粉水解鋂與小麥澱粉 於37℃反應1 天後，分別添加amyloglucosidase及α-amylase，對小麥澱粉之水解率 由82％提高達94％及89％