Studies on helper components of zucchini yellow mosaic virus and watermelon mosaic virus-1

矮南瓜黃化嵌紋病毒（Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV ）與西瓜嵌紋病毒－１ （Watermelon mosaic virus-1,WMV-1 ）屬於Potyvirus 群，皆以非永續性方式經蚜 蟲媒介傳播，而在蚜蟲傳播上，協助成份（Helper component）扮演重要角色。因此 ，為探討兩種病毒之協助成份與媒介病毒之關係，首先進行病毒純化試驗。試驗中利 用方法I與方法Ⅱ兩種不同步驟，分別純化ZYMV及WMV－１，結果在純化過程 中，以方法Ⅱ之步驟較適合於兩病毒的純化。再依方法Ⅱ之步驟，分別於該緩衝液中 添加還原劑，鉗合劑或不同pH值，以進行一系列比較試驗，結果得知，病毒的純化 以０．５M，７．０，內含０．１％NaSO之鉀鹽磷酸緩衝液最為適當。 為瞭解兩病毒之協助成份性質，以不同分離與濃縮分別萃取粗汁液中協助成份或製備 部分純化之協助成份，再依蚜蟲人工膜餵食試驗（Artificial membrane feeding ） ，探討協助成份的活性，結果兩病毒協助成份皆在０．５M，pH８．０，內含０． １％NaSO之鉀鹽磷酸緩衝液中活性最高，但若以兩病毒協助成份相比較，則 發現WMV－１協助成份穩定性較高，又兩種協助成份易受純化病毒時所用有機溶媒 氯仿、四氯化碳或界面活性劑Triton＊－１００作用而失去活性。而將兩病毒協助成 份互換進行蚜蟲媒介病毒試驗，發現兩種協助成份對異源病毒（heterologouts vir- us）協助能力皆比同源病毒（homologous virus）降低三倍左右，由此表示，病毒之 協助成份隨種類不同而有某些程度的專一性。同時，使用Sepharose CL-6B 凝膠過濾 進一步純化兩病毒之協助成份，結果所得三種不同分子量的純化試液，尚無發現傳播 病毒能力，至於原因，則有待進一步研究