Kloniersysteme fuer Streptomyceten Proteinsekretionssysteme und Entwicklung proteasearmer Wirtsstaemme. Schlussbericht

Gentechnology became recently available for Streptomycetes, especially for excreted proteins. The long-lasting experience in Streptomyces fermentation asks for efforts to use these bacteria as hosts for overproduction of excretable enzymes. Protease-poor strains should be screened. Genetic engineering tools and methods for use with S. griseus N2-3-11 and S. galbus DSM 40480 have been developed. Genes for protease A and B and of the StrK phosphatase were cloned from S. griseus N2-3-11 and expressed in S. lividans 66 and S. galbus DSM 40480. Signalpeptide sequences were used for construction of expression-cassettes in streptomycetes. Heterologous gene expression in streptomycetes will be useful in future and the project therefore will be continued. (orig.)Gentechnische Methoden sind seit kurzem fuer Streptomyceten, besonders fuer exkretierte Proteine, verfuegbar. Die lange Erfahrung in der Fermentationstechnologie der Streptomyceten macht Anstrengungen zur Entwicklung dieser Bakteriengruppe als Wirtssysteme fuer die heterologe Proteinexkretion erforderlich. Die Gentechnik fuer die Staemme S. griseus N2-3-11 und S. galbus DSM 40480 wurde entwickelt. Die Gene fuer Protease A und B sowie der StrK Phosphatase (extrazellulaere Enzyme) wurden aus S. griseus kloniert und in S. lividans 66 und S. galbus DSM 40480 exprimiert. Signalpeptidsequenzen wurden fuer die Konstruktion von Expressionskassetten in Streptomyceten verwendet. Die heterologe Genexpression wird in Streptomyceten moeglich sein und sollte in dem fortgefuehrten Vorhaben weiterentwickelt werden. (orig.)Available from TIB Hannover: D.Dt.F. AC1000(44,10) / FIZ - Fachinformationszzentrum Karlsruhe / TIB - Technische InformationsbibliothekSIGLEBundesministerium fuer Forschung und Technologie (BMFT), Bonn (Germany)DEGerman