Contribution à l'étude de l'a(1,4)-fucosylation chez les végétaux (Purification partielle de l'a(1,4)-fucosyltransferase de S. alba et clonage du gène correspondant chez A. thaliana)

Parmi les oses qui entrent dans la composition des N-glycannes végétaux, le fucose peut être transféré respectivement selon une liaison a(1,3)- sur le chitobiose et/ou en a(1,4) sur un groupement de lacto-N-biose par des a(1,3) ou des a(1,4)-fucosyltransférases. Cependant, aucun gène d'a(1,4)-fucosyltransférase n'a été cloné à ce jour. Dans le but d'obtenir des données moléculaires sur les a(1,4)-fucosyltransférases végétales, une démarche de purification protéique et une approche de clonage de gènes ont été entreprises. La purification protéique a été réalisée sur des cellules en culture de Silene alba. Bien que partielle, elle a permis de caractériser l'enzyme végétale en termes de spécificités de substrats accepteurs et de mécanisme catalytique. Elle a également permis de proposer l'hypothèse de l'existence d'une forme soluble d'a(1,4)-fucosyltransférase chez cette espèce en plus d'une forme membranaire.Avec le modèle Arabidopsis thaliana, nous avons pu identifiér le premier gène végétal codant une a(1,4)-fucosyltransférase.Cette enzyme présente quelques similitudes avec les autres a(1,3/4)-fucosyltransférases connues et s'exprime dans les différents organes étudiés de la plante (feuilles, racines et fleurs). l'étude de la répartition tissulaire et cellulaire du produit de l'a(1,4)-fucosyltransférase, le motif Lewis a, confirme les résultats obtenus et montre en plus que les protéines a(1,4)-fucosylées sont essentiellement présentes à la surface de la cellule végétale et dans les différents organes étudiés,végétatifs comme reproducteurs.LIMOGES-BU Sciences (870852109) / SudocSudocFranceF