IMPLICATION DE LA PROTEINE KINASE DANS LA PROLIFERATION CELLULAIRE

LA PROTEINE KINASE CK2 EST UNE SERINE/THREONINE KINASE QUI SE PRESENTE CLASSIQUEMENT APRES PURIFICATION SOUS LA FORME D'UN HETEROTETRAMERE, COMPOSE DE DEUX SOUS-UNITES CATALYTIQUES CK2ALPHA ET/OU CK2ALPHA' ASSOCIEES FORTEMENT A DEUX SOUS-UNITES DITES REGULATRICES CK2BETA. IL S'AGIT D'UNE ENZYME UBIQUISTE ET PHYLOGENETIQUEMENT CONSERVEE DE LA LEVURE A L'HOMME DONT LA REGULATION ET LA FONCTION BIOLOGIQUE SONT ENCORE MECONNUES. L'OBJECTIF DE CE TRAVAIL A ETE DE DETERMINER LA PLACE ET LE ROLE EVENTUEL DE LA SOUS-UNITE CATALYTIQUE CK2ALPHA DANS LA SIGNALISATION MITOGENIQUE ET D'ETUDIER LA FONCTION DE LA PROTEINE KINASE CK2 DANS LA PROLIFERATION CELLULAIRE DES LIGNEES DE FIBROBLASTES NIH3T3 ET CCL39. AU COURS DE CETTE ETUDE, J'AI PU MONTRER QUE CK2ALPHA FORME UN COMPLEXE MOLECULAIRE AVEC LA PROTEINE PHOSPHATASE 2A (PP2A) ET CIBLE L'ACTIVITE PHOSPHATASE SUR MEK1, COMPOSANT CENTRAL DE LA VOIE ERK/MAPK, CONNUE POUR REGULER LA PROLIFERATION CELLULAIRE. LA SUREXPRESSION DE CK2ALPHA EST CAPABLE D'INHIBER L'ACTIVATION DE MEK1 ET DE ERK/MAPK PAR LE SERUM. J'AI EGALEMENT PU MONTRER QUE CE MECANISME DE REGULATION ETAIT SPECIFIQUE DU MODULE ERK/MAPK. L'ETUDE DES EFFETS BIOLOGIQUES DE CE COMPLEXE CK2ALPHA-PP2A INDIQUE QUE LA SUREXPRESSION DE CK2ALPHA INHIBE LA TRANSFORMATION CELLULAIRE DES FIBROBLASTES NIH3T3 INDUITE PAR RAS ONCOGENIQUE, MAIS N'AFFECTE PAS LA PROLIFERATION CELLULAIRE. LA SUREXPRESSION DES DIFFERENTES FORMES DE CK2 N'A AUCUN EFFET DETECTABLE SUR LA PROLIFERATION CELLULAIRE. PAR CONTRE, L'UTILISATION D'UN MUTANT DOMINANT INACTIF DE LA SOUS-UNITE CATALYTIQUE CK2ALPHA : CK2ALPHAK68A INHIBE LA PROGRESSION EN G1 DU CYCLE CELLULAIRE DES FIBROBLASTES NIH3T3 ET CCL39. J'AI ENSUITE ANALYSE LE MECANISME D'ACTION DE CE MUTANT DOMINANT INACTIF. J'AI PU MONTRER QUE CK2ALPHAK68A S'ASSOCIE A LA SOUS-UNITE REGULATRICE CK2BETA ENDOGENE ET QU'IL EST INCAPABLE, NI DE MODULER L'EXPRESSION DES SOUS-UNITES DE CK2 ENDOGENES, NI DE GENERER DE CK2ALPHA LIBRE DETECTABLE. J'AI MONTRE QUE L'EFFET OBSERVE SUR LA PROLIFERATION NE DEPEND PAS DE LA CAPTURE PAR CK2ALPHAK68A D'UNE POPULATION DE CK2BETA LIBRE PRESENTE DANS LA CELLULE. LE MECANISME D'ACTION DE CK2ALPHAK68A SEMBLE PLUTOT REPOSER SUR L'INHIBITION DE LA PHOSPHORYLATION DE SUBSTRATS ENDOGENES. CES DERNIERS RESTENT A CARACTERISER.GRENOBLE1-BU Sciences (384212103) / SudocSudocFranceF