MISE AU POINT DE NOUVELLES METHODOLOGIES D'ANALYSE PAR BIOCAPTEUR DE MELANGES DE GLUCOSE ET SACCHAROSE. APPLICATION A L'ANALYSE DES JUS DE FRUITS

CE MEMOIRE PRESENTE DIFFERENTES STRATEGIES DE PREPARATION DE BIOCAPTEURS POUR L'ANALYSE SIMULTANEE DU SACCHAROSE ET DU GLUCOSE. DANS TOUS LES CAS, LA METHODE DE DETECTION EST ELECTROCHIMIQUE ET UTILISE LA TECHNIQUE AMPEROMETRIQUE EN MODE DYNAMIQUE D'ANALYSE PAR INJECTION EN FLUX CONTINU. LE TRANSDUCTEUR EST UNE ELECTRODE A PATE DE CARBONE MODIFIEE PAR LA GLUCOSE OXYDASE, UNE PEROXYDASE ET LE FERROCENE COMME MEDIATEUR REDOX. LES DEUX PREMIERES METHODES REPOSENT SUR UN DOSAGE INDIRECT DU SACCHAROSE PAR MESURE DIFFERENTIELLE DU GLUCOSE AVANT ET APRES UNE ETAPE D'HYDROLYSE. L'UTILISATION, EN SOLUTION OU SOUS FORME IMMOBILISEE DANS UN REACTEUR, DE LA -FRUCTOSIDASE ET DE LA MUTAROTASE A ETE OPTIMISEE POUR OBTENIR UNE HYDROLYSE TOTALE DU SACCHAROSE ET UN SIGNAL REPRESENTATIF DU GLUCOSE. LE CAS DE SOLUTIONS CONTENANT DE FAIBLES CONCENTRATIONS DE SACCHAROSE PAR RAPPORT A CELLES DU GLUCOSE A NECESSITE LE DEVELOPPEMENT D'UNE METHODOLOGIE METTANT EN UVRE DEUX REACTEURS CONSECUTIFS, L'UN POUR L'ELIMINATION DU GLUCOSE ET L'AUTRE POUR L'HYDROLYSE DU SACCHAROSE. NOUS AVONS OPTIMISE LA PREPARATION DE CES REACTEURS POUR REPONDRE AUX EXIGENCES QU'IMPOSE LA MESURE DES SUCRES DANS LES ECHANTILLONS REELS DE JUS DE FRUITS. POUR CHACUNE DES METHODOLOGIES PROPOSEES UNE VALIDATION SUR DES ECHANTILLONS DIVERSIFIES, A BASE DE JUS DE FRUITS, A ETE REALISEE EN COMPARANT LES RESULTATS OBTENUS A CEUX DE LA METHODE STANDARD UTILISANT LA SPECTROSCOPIE U.V.. NOUS AVONS EGALEMENT MONTRE DANS CE MEMOIRE QUE LA DETECTION DU GLUCOSE A L'AIDE DE L'ELECTRODE ENZYMATIQUE UTILISEE ETAIT PLUS COMPLEXE QU'ELLE N'ETAIT COURAMMENT ADMISE. ELLE METTAIT EN JEU DEUX REACTIONS CONCURRENTES QUI AFFECTAIENT LE SIGNAL AMPEROMETRIQUE. LES EFFETS DE DIFFERENTS PARAMETRES PHYSICO-CHIMIQUES SUR LES CINETIQUES DES DEUX REACTIONS ONT ETE EVALUES ET LES CONDITIONS EXPERIMENTALES ONT ETE DEFINIES POUR OBTENIR UN SIGNAL FIDELE ET REPRESENTATIF DES CONCENTRATIONS REELLES EN GLUCOSE.NANTES-BU Sciences (441092104) / SudocSudocFranceF