Etude des mécanismes d'activation (rôle et cibles de MAPK de type ERK au cours de la différenciation mégacaryocytaire induite par la TPO)

La thrombopoïétine et son récepteur, Mpl, jouent un rôle majeur dans la survie et la prolifération des progéniteurs hématopoïétiques multipotentiels, l'expansion de la lignée mégacaryocytaire et la formation de plaquettes. L'étude de lignées cellulaires exprimant Mpl établies au laboratoire (UT7-Mpl), ainsi que celle de mégacaryocytes normaux, ont permis de montrer que ce sont des différences quantitatives dans l'intensité et la durée du signal, et non l'activation en soi des MAPK (Mitogen Activated Protein Kinases) de type ERK qui jouent un rôle primordial dans la décision de la cellule UT7-Mpl à différencier vers une voie donnée ou à proliférer en réponse à une cytokine. L'objectif principal de mon projet de thèse était de comprendre 1) comment les MAP kinases sont activées par la TPO et 2) comment elles participent à la différenciation et/ou prolifération des précurseurs mégacaryocytaires en cherchant leurs substrats spécifiques dans ces cellules. En ce qui concerne le mécanisme d'activation de ERK par la TPO, nos travaux préalables ont montré que le mutant de Mpl, MplDelta3, n'est plus capable d'induire la maturation mégacaryocytaire et active le MAPK de façon transitoire. Nous avons donc cherché à comprendre comment la région Delta3 de Mpl participe au signal MAPK, en tentant d'identifier les voies de signalisation qu'elle active. L'identification de ces voies de signalisation constitue une étape vers la compréhension des mécanismes moléculaires régulant la mégacaryopoïèse. Nous avons montré que le signal MAPK induit par la TPO est le produit de deux vagues d'activation, l'une précoce et transitoire dépendante de Ras/Raf-1 et l'autre, ayant lieu tardivement mais persistant à long terme, impliquant Rap1/B-Raf. C'est pour cette dernière vague de signalisation que la présence de la région Delta3 semble cruciale...Thrombopoietin and its receptor play a major role in survival and proliferation of multipotent hematopoietic progenitors, in the expansion of megakaryocytic lignage and in platelet formation. The study of megakaryocytic cell lines expressing the TPO receptor established in the laboratory (UT7-Mpl) and of normal human megakaryocytes, have shown that : it is the quantitative differences in the intensity and duration of the signal and not the actual activation of ERK MAPK (Mitogen Activated Protein Kinases) that play an essential role in the decision by the cell to differentiate into a given pathway or to proliferate in reponse to a cytokine. The main project of this thesis was to understand 1) how are MAPKs activated by TPO and 2) how do they participate in the differentiation and/or proliferation of megakaryocytic precursors by searching their specific substrates in these cells...PARIS5-BU Saints-Pères (751062109) / SudocSudocFranceF